Anticuerpo policlonal de conejo Acetil-Histona H2A (K5) (P04908/P0C0S8) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Histona H2A

• La Histona H2A es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en la cromatina. Esto limita la accesibilidad al ADN y desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.
• La localización subcelular de la H2A se produce principalmente en el núcleo y los cromosomas.
• La Histona H2A está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales (PTM) en su cola N-terminal, que incluyen acetilación, metilación, fosforilación y ubiquitinación. Estas modificaciones constituyen el "código de histonas" y regulan la dinámica de la cromatina.
• La acetilación en la lisina 5 (H2AK5ac) es una marca epigenética clave asociada a la transcripción activa y la cromatina abierta. Este anticuerpo se obtiene frente a un péptido acetilado sintético de la región de K5 y reconoce específicamente la forma acetilada.
• Múltiples genes codifican variantes de H2A (por ejemplo, H2AC4, H2AC8, H2AC11, H2AC15, H2AC16, H2AC17), que están altamente conservadas entre especies. La secuencia del inmunógeno se deriva de la H2A humana y se espera que presente reactividad cruzada con ortólogos debido a la alta homología de secuencia.

Referencias relacionadas: UniProt P04908 y UniProt P0C0S8 anotizan de forma completa las funciones y modificaciones de la histona H2A.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido acetilado sintético de la región de K5. Para confirmar la especificidad por la forma acetilada, se recomienda utilizar bloqueo con péptido no acetilado o comparar las señales de células tratadas con inhibidores de histona deacetilasas (por ejemplo, tricostatina A, butirato de sodio) frente a controles sin tratar.
• En western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 14 kDa para la Histona H2A. La intensidad de la señal dependerá del estado de acetilación de la muestra.
• Para inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización. La fijación con metanol o la permeabilización con Tritón X-100 suelen ser eficaces para objetivos de histonas nucleares.
• Este anticuerpo ha sido validado para ELISA y puede ser adecuado para ensayos cuantitativos cuando se combina con estándares apropiados.
• La reactividad cruzada registrada incluye humano, ratón y rata, y se predice una amplia reactividad para otras especies basada en la homología de secuencia. Valide la reactividad en su sistema modelo específico si no ha sido probada previamente.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, puede producirse variación entre lotes. Se recomienda la titulación y optimización para cada aplicación y tipo de muestra.

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