Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Acetil-Histona H3-K14 (Q16695/P68431) para WB, ChIP, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

• La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad fundamental de la cromatina, que empaqueta el ADN y regula el acceso para la transcripción, replicación, reparación y estabilidad cromosómica. Los nucleosomas consisten en aproximadamente 146 pb de ADN envuelto alrededor de un octámero de histonas (dos de cada H2A, H2B, H3 y H4).
• La acetilación en la lisina 14 de la Histona H3 (H3K14ac) es una marca epigenética bien caracterizada asociada con genes activamente transcritos y regiones de cromatina abierta. Es catalizada principalmente por histona acetiltransferasas como GCN5/PCAF y es reconocida por proteínas que contienen dominios bromodominio. Referencias relacionadas: PMID:16457588, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:17194708
• La Histona H3.1 canónica (codificada por múltiples genes incluyendo HIST1H3A, etc., SWISS P68431) se expresa de manera dependiente de la replicación durante la fase S y se deposita en todo el genoma. En contraste, la Histona H3.1t (SWISS Q16695, gen H3-4/HIST3H3) es una variante específica de testículo que reemplaza a la H3 canónica durante la espermatogénesis.
• Tanto H3.1 como H3.1t comparten un alto grado de identidad de secuencia, incluyendo la región N-terminal que contiene la K14. El inmunógeno del anticuerpo, un péptido sintético acetilado en K14, garantiza el reconocimiento específico de esta modificación en ambas variantes.
• La localización subcelular de la Histona H3 es nuclear, donde se asocia predominantemente con los cromosomas. La especificidad tisular para H3.1t está restringida a las células testiculares, mientras que H3.1 es ubicua.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del Inmunógeno: El anticuerpo se generó contra un péptido sintético acetilado alrededor de la K14 de la H3 humana, lo que garantiza una alta especificidad para la forma acetilada. Se pueden emplear ensayos competitivos utilizando péptido no acetilado para confirmar la unión específica de la modificación.
• Western Blotting (WB): La Histona H3 migra aproximadamente a 15 kDa en condiciones estándar de SDS-PAGE. Para una detección óptima, considere usar extractos nucleares y extracción ácida suave para enriquecer las proteínas histonas. Incluya siempre controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, células tratadas con inhibidores de histona deacetilasas vs. no tratadas).
• Inmunoprecipitación de Cromatina (ChIP): Este anticuerpo está listado para aplicaciones de ChIP; sin embargo, puede ser necesaria la optimización del entrecruzamiento, el cizallamiento de la cromatina y la concentración de anticuerpo dependiendo de las regiones genómicas diana y el tipo celular.
• Inmunofluorescencia/Inmunohistoquímica (IF/IHC): Se espera tinción nuclear. Para secciones incluidas en parafina (IHC-P), puede ser necesaria la recuperación antigénica. Valide la especificidad del anticuerpo con péptidos bloqueadores o mediante comparación con controles de isotipo.
• Reactividad de Especies: El anticuerpo reacciona de forma cruzada con humano, ratón y rata debido a la alta conservación de secuencia alrededor de la K14. Para otras especies, verifique la alineación de secuencias antes de su uso.
• General: Como anticuerpo monoclonal de conejo, proporciona alta afinidad, consistencia de lote a lote y bajo fondo. Almacene a -20°C y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio equipa a fabricantes de diagnósticos, laboratorios de investigación e institutos académicos con una selección integral de materias primas para IVD, desde pares de anticuerpos validados y anticuerpos monoclonales/policlonales optimizados hasta reactivos auxiliares a granel. Nuestro portafolio de productos incluye reactivos especializados de anticuerpos acetilados como este Acetil-Histona H3-K14 Ac m de conejo, que sirve como una herramienta confiable para el desarrollo de biomarcadores epigenéticos y la investigación de la cromatina. Más allá de los artículos estándar del catálogo, CamelBio ofrece diseño de antígenos personalizados y abastecimiento de materias primas para dianas raras para acelerar su línea de desarrollo de ensayos. Asóciese con CamelBio para optimizar el desarrollo de su producto desde el concepto hasta la clínica.