Anticuerpo policlonal de conejo anti-Acetil-Histona H3-K23 (Q16695/P68431) para WB, ChIP, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central de los nucleosomas, las unidades repetitivas fundamentales de la cromatina. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN, restringiendo el acceso a las maquinarias celulares que requieren el ADN como plantilla. A través de este papel estructural, las histonas son centrales en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad se modula dinámicamente por una compleja variedad de modificaciones postraduccionales (MPT) conocidas colectivamente como el código de histonas, junto con el remodelado de nucleosomas.

La acetilación en la lisina 23 (K23) de la cola N-terminal de la histona H3 es una MPT significativa que contribuye a la descondensación de la cromatina y la activación génica. Este sitio corresponde a K24 en algunas numeraciones de secuencia debido al corte de la metionina iniciadora. Múltiples estudios han identificado la acetilación de K23 en diversos contextos celulares, vinculándola con estados de cromatina abierta y regulación transcripcional.

Referencias relacionadas: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16457588

La proteína Histona H3.1 (codificada por genes como H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 y HIST1H3A) típicamente se localiza en el núcleo y el cromosoma. La isoforma específica de testículos H3.1t (Q16695) se expresa en células testiculares, mientras que la H3.1 canónica (P68431) es ubicua. Ambas variantes comparten el sitio de acetilación K23 conservado.

La histona H3 está sujeta a numerosas MPT adicionales, incluyendo metilación, fosforilación, citrulinación y otras acilaciones, que regulan de manera intrincada la función de la cromatina. La especificidad del anticuerpo para la forma acetilada en K23 permite una disección precisa de estos mecanismos reguladores.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se genera contra un péptido sintético acetilado correspondiente a los residuos que rodean K23 de la Histona H3 humana. Se predice reactividad cruzada en una amplia gama de especies debido a la conservación de secuencia de esta región; siempre confirme con sus propias muestras.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 15 kDa. Considere cargar controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, células tratadas con inhibidores de histona deacetilasas vs. no tratadas) para verificar la señal dependiente de acetilación.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), puede ser necesaria la optimización de la recuperación antigénica y el bloqueo; valide la especificidad usando competición con péptido o líneas celulares knockout si están disponibles.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), asegure una reticulación y fragmentación adecuadas. Incluya un control de IgG no específica y pruebe diferentes concentraciones de anticuerpo. Este anticuerpo es adecuado para ChIP según lo indicado por el proveedor.
• Las aplicaciones de ELISA y otras deben validarse en el sistema de muestra relevante. La sensibilidad y especificidad pueden variar entre ensayos.
• Como con cualquier anticuerpo específico para una modificación en un sitio, la consistencia entre lotes puede afectar los resultados; siempre titule y confirme la dilución óptima de trabajo.

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