Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Acetil-Histona H3-K27 para ChIP, WB e IHC (SWISS: Q16695 / P68431)

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3 (acetilación K27)

• La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina, limitando así la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares que lo requieren como plantilla. Las histonas juegan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN está regulada dinámicamente por un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (MPT), conocidas colectivamente como el código de histonas, y por el remodelado de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• La Histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y es un componente estructural clave de los cromosomas. Se encuentra tanto en eucromatina como en heterocromatina, donde sus patrones de MPT distinguen estos estados. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Dos isoformas principales están representadas por los accesos SWISS Q16695 (histona H3.1t específica de testículo) y P68431 (histona H3.1 dependiente de replicación), que se expresa ampliamente. La variante específica de testículo se expresa exclusivamente en células testiculares. Referencias relacionadas: UniProt Q16695
• La Histona H3 sufre una amplia gama de modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinación y ADP-ribosilación. La acetilación de residuos de lisina específicos es una marca epigenética crítica asociada con la activación transcripcional. Por ejemplo, la acetilación en la lisina 19 (K19ac) ha sido identificada por múltiples estudios (PMID:19608861). Si bien la base de conocimientos de UniProt no anota actualmente la acetilación en K27, esta modificación es una marca bien caracterizada en la literatura. La marca acetil-lisina está regulada dinámicamente por histona acetiltransferasas (HATs) y desacetilasas (HDACs), influyendo en la estructura de la cromatina y la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:19608861, UniProt Q16695

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético acetilado alrededor de K27, lo que indica la especificidad del anticuerpo por el estado acetilado. Verifique la especificidad utilizando controles de competición con péptido no acetilado o de desacetilación enzimática.
• Este anticuerpo ha sido validado para una amplia gama de aplicaciones: Western Blot (WB), Dot Blot (DB), Inmunohistoquímica-Paraffina (IHC-P), Inmunofluorescencia/Inmunocitoquímica (IF/ICC), ELISA, Inmunoprecipitación de Cromatina (ChIP) y ChIP-seq. Para aplicaciones de ChIP, considere optimizar la concentración de anticuerpo y el entrecruzamiento para su contexto de cromatina específico.
• El peso molecular predicho es de 15 kDa. Utilice geles de SDS-PAGE de alto porcentaje (ej., 15%) o geles gradiente para una resolución óptima de proteínas de bajo peso molecular.
• Se predice reactividad cruzada para Humano, Ratón, Rata y otras especies (Amplio Rango Predicho) basándose en la conservación de la secuencia de la histona H3. Valide en su especie objetivo si no está específicamente listada.
• Los protocolos de extracción de histonas (extracción ácida o con alta concentración de sal) pueden mejorar la señal en WB al enriquecer las proteínas nucleares.
• Para aplicaciones cuantitativas, considere usar histona H3 recombinante con y sin acetilación K27 como estándares.

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