Anticuerpo policlonal de conejo anti-Histona H3 acetilada (K36) (Q16695/P68431) para WB y ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina, por lo que desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula dinámicamente mediante modificaciones postraduccionales (MPT), comúnmente denominadas "código de histonas". Referencias relacionadas: UniProtKB P68431

La acetilación en la lisina 36 (K36, que corresponde a la posición 37 en la proteína H3 madura) es una modificación bien caracterizada asociada a la cromatina transcrita activamente. Esta marca de acetilación es depositada dinámicamente por las histonas acetiltransferasas y eliminada por las desacetilasas, contribuyendo a la regulación de la expresión génica y la estructura de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:17189264, PMID:17194708

La histona H3.1 canónica (codificada por múltiples genes como H3C1–H3C12) se expresa de forma ubicua, mientras que la variante H3.1t específica de testículo (H3-4) está restringida a las células testiculares. El anticuerpo reconoce la K36 acetilada en múltiples variantes de H3 debido a la conservación de la secuencia alrededor del sitio de modificación. Referencias relacionadas: UniProtKB Q16695

La localización subcelular de la histona H3 es nuclear, y está estrechamente asociada al ADN cromosómico durante todo el ciclo celular. La H3 fosforilada es un marcador ampliamente utilizado para la condensación cromosómica durante la mitosis. Referencias relacionadas: UniProtKB P68431

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético acetilado que abarca la K36 de la histona H3 humana. Para confirmar la especificidad del anticuerpo, se recomienda realizar ensayos de bloqueo con péptidos utilizando el péptido acetilado frente al péptido no acetilado.
• En aplicaciones de Western blot (WB), valide el anticuerpo en sistemas de muestra relevantes (por ejemplo, lisados totales de células HeLa) y utilice controles adecuados, como histonas extraídas de células tratadas con inhibidores de HDAC para enriquecer la acetilación.
• Para ELISA, el péptido acetilado se puede utilizar como antígeno de recubrimiento; la actividad debe verificarse frente al péptido sin modificar para garantizar la unión específica a la modificación.
• Este anticuerpo muestra una amplia reactividad cruzada entre especies (humano, ratón, rata, y se predice un amplio rango), pero es recomendable verificar inicialmente la reactividad en la especie y el tejido específicos de interés.
• Debido a la naturaleza policlonal, se debe monitorear la consistencia entre lotes; incluya un control positivo estándar en cada experimento.

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