Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Histona H3-K4 Acetilada (Q16695/P68431) para WB, IP, IHC, ChIP, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Junto con las histonas H2A, H2B y H4, forma un octámero alrededor del cual se envuelven aproximadamente 147 pb de ADN, facilitando la compactación y organización del ADN dentro del núcleo. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Los nucleosomas regulan la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular, desempeñando así un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. Esta función reguladora se media a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (PTM) en las histonas, denominadas colectivamente el "código de histonas". Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

La acetilación es una de las PTM más estudiadas y generalmente se asocia con un estado de cromatina abierto y transcripcionalmente activo. La acetilación de residuos de lisina específicos, incluida la lisina 4 (H3K4ac), desempeña un papel crítico en la regulación epigenética y la expresión génica. Referencias relacionadas: UniProt P68431 (anotaciones de acetilación)

Existen múltiples formas variantes de la histona H3 en los mamíferos. La H3.1 canónica (codificada por múltiples genes como los bajo el número de acceso P68431) se expresa durante todo el ciclo celular, mientras que la variante H3.1t (número de acceso Q16695) se expresa en células testiculares. El epítopo para este anticuerpo se encuentra en una región de la cola N-terminal altamente conservada, lo que permite una amplia reactividad cruzada entre especies. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

La histona H3 se localiza en el núcleo y está estrechamente asociada con el ADN cromosómico. Su presencia en regiones transcritas activamente y en elementos regulatorios subraya la importancia de estudiar modificaciones específicas de sitio como la acetilación de H3K4. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido acetilado sintético que rodea la lisina 4 de la histona H3 humana, diseñado para reconocer específicamente la forma acetilada de H3K4.
• Las aplicaciones recomendadas incluyen Western blot (detección de una banda a ~15 kDa), inmunoprecipitación, inmunofluorescencia/ICC, inmunohistoquímica (parafina), dot blot, inmunoprecipitación de cromatina y ELISA.
• Para ChIP, considere optimizar las condiciones de entrecruzamiento y sonicación; la especificidad del anticuerpo por el epítopo acetilado lo hace adecuado para capturar regiones de cromatina transcritas activamente.
• Al usarlo para IP o IF, valide el anticuerpo en su sistema de muestra específico e incluya los controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, tratamiento con inhibidores de histona desacetilasas para aumentar los niveles de acetilación).
• Debido a la alta conservación entre especies, se espera reactividad cruzada con humano, ratón, rata y otras especies (rango amplio predicho); verifique en especies no típicas si es necesario.
• Para aplicaciones críticas, se puede considerar la preadsorción con péptido no acetilado para confirmar la especificidad.

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