Anticuerpo policlonal de conejo anti-Acetil-Histona H3 (K4/K9/K14/K18/K23/K27) (Q16695 / P68431) para WB, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Acetil-Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN, regulando así el acceso al material genético. Este empaquetamiento dinámico juega un papel central en la transcripción, replicación y reparación del ADN, y en la estabilidad cromosómica.

Referencias relacionadas: UniProt Q16695 / P68431

Las modificaciones postraduccionales de las histonas, particularmente la acetilación de residuos específicos de lisina en el extremo N-terminal, forman una parte crítica del "código de histonas" que gobierna la estructura y función de la cromatina. La acetilación en los residuos K4, K9, K14, K18, K23 y K27 de la Histona H3 se asocia con la activación transcripcional, ya que neutraliza la carga positiva de las lisinas, debilitando las interacciones histona-ADN y promoviendo una conformación de cromatina abierta. Estas modificaciones son escritas por histona acetiltransferasas (HATs) y borradas por histona deacetilasas (HDACs), y sirven como sitios de acoplamiento para varias proteínas efectoras.

Referencias relacionadas: Acetilación K4 (K5): PMID:17194708, Acetilación K9 (K10): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilación K14 (K15): PMID:16185088, PMID:16267050, Acetilación K18 (K19): PMID:16267050, PMID:16627869, Acetilación K23 (K24): PMID:16267050, PMID:16457588, Acetilación K27 (K28): PMID:16627869, PMID:17194708

La histona H3 se localiza predominantemente en el núcleo, donde se asocia con el ADN cromosómico. La variante canónica H3.1 (P68431) se expresa en la mayoría de las células somáticas, mientras que la variante específica de tejido H3.1t (Q16695) está restringida a las células testiculares. La amplia reactividad cruzada predicha del anticuerpo cubre ambas variantes.

Referencias relacionadas: Localización subcelular: UniProt Q16695 / P68431, Especificidad de tejido: Q16695

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno fue un péptido sintético acetilado que contenía las modificaciones K4 y K27; el anticuerpo puede reconocer preferentemente estos epítopos, pero es posible un reconocimiento más amplio de lisinas acetiladas de manera similar. Considere validar la especificidad utilizando controles de péptidos mutantes o no modificados.
• Para Western blot, se recomiendan histonas extraídas con ácido o extractos nucleares para enriquecer el objetivo; el tamaño de banda esperado es de aproximadamente 15 kDa.
• En ELISA, el recubrimiento con péptidos acetilados o preparaciones de histonas nativas puede ayudar a confirmar la reactividad; titula el anticuerpo y el sistema de detección para obtener una relación señal-ruido óptima.
• La histona H3 está altamente conservada entre especies; se predice que el anticuerpo reacciona con una amplia gama de organismos, pero se recomienda la validación en el sistema de muestra del usuario.
• Para mantener la estabilidad, alícuota y almacena a -20°C o -80°C después de la reconstitución, y evita ciclos repetidos de congelación-descongelación.

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