Anticuerpo monoclonal de conejo Acetil-Histona H3-K56 (Q16695 / P68431) para ChIP, WB e IF

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la Histona H3

La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Junto con las histonas H2A, H2B y H4, forma un octámero alrededor del cual se enrolla el ADN, compactando el genoma y regulando el acceso para la transcripción, replicación y reparación. Esta arquitectura sustenta la estabilidad cromosómica y el control dinámico de la expresión génica.

Referencias relacionadas:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• La Histona H3 está sujeta a una amplia gama de modificaciones postraduccionales (MPT), a menudo denominada el "código de histonas". Estas incluyen acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y muchas otras, que modulan de forma colectiva la estructura de la cromatina y el reclutamiento de proteínas efectoras. La acetilación en la lisina 56 (K56) es una marca especialmente destacada implicada en el ensamblaje de nucleosomas, la respuesta al daño del ADN y la regulación transcripcional.

Referencias relacionadas:

• PMID:17194708

• PMID:19608861

• La Histona H3 se localiza exclusivamente en el núcleo y se asocia a los cromosomas durante la división celular. La variante canónica H3.1 (codificada por múltiples genes, entre ellos HIST1H3A, SWISS P68431) se expresa de forma dependiente de la replicación durante todo el ciclo celular, mientras que la variante H3.1t (Q16695) es específica de los testículos y contribuye a la organización de la cromatina en las células germinales masculinas.

Referencias relacionadas:

• UniProtKB Q16695

• UniProtKB P68431

• Los anticuerpos contra K56 acetilado son herramientas valiosas para estudiar el ensamblaje de cromatina acoplado a la replicación del ADN, las vías de estrés genotóxico y la dinámica de la herencia epigenética. El inmunógeno específico para acetilo utilizado para generar este anticuerpo garantiza una alta selectividad por la forma modificada frente a la H3 no modificada.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la K56 acetilada de la Histona H3 humana. Este diseño confiere una alta especificidad; sin embargo, los investigadores pueden considerar verificar la selectividad comparando las señales entre controles bloqueados con péptido acetilado y no acetilado en sus sistemas experimentales.
• El anticuerpo se recomienda para una amplia gama de aplicaciones, incluyendo ChIP-seq, CUT&Tag e IF. Para ensayos basados en cromatina, optimice las condiciones de reticulación y sonicación para preservar el epítopo de acetilación de K56. En inmunofluorescencia, se espera un patrón de tinción nuclear.
• El peso proteico predicho es de 15 kDa. Al realizar WB, incluya marcadores de peso molecular adecuados y considere utilizar un protocolo de extracción de histonas para enriquecer proteínas nucleares.
• Aunque se predice reactividad cruzada en una amplia gama de especies, es recomendable validar el rendimiento en muestras no humanas mediante alineamiento de secuencias alrededor del sitio de acetilación o mediante pruebas en el material biológico correspondiente.

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