Anticuerpo policlonal de conejo contra Acetil-Histona H3 K9 (Q16695/P68431) - WB IP IF IHC ChIP ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la Histona H3

La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas enrollan y compactan el ADN, regulando así la accesibilidad a la maquinaria transcripcional. Las histonas, incluida la H3, cumplen un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula dinámicamente mediante diversas modificaciones postraduccionales (MPT) en las histonas, denominadas colectivamente el "código de histonas", y la remodelación de nucleosomas.

La Histona H3 se localiza en el núcleo y los cromosomas. En los seres humanos existen dos isoformas principales: la Histona H3.1 canónica dependiente de la replicación (codificada por múltiples genes como H3C1/HIST1H3A, H3C2/HIST1H3B, etc., UniProt: P68431) y la isoforma independiente de la replicación específica de testículo H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3, UniProt: Q16695). Mientras que la H3.1 se expresa de forma generalizada, la expresión de H3.1t está restringida a las células testiculares.

Una característica distintiva de la Histona H3 es su amplio conjunto de MPT, que incluyen acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y otras. La acetilación de la lisina 9 (K9) de H3 es una marca epigenética bien caracterizada que generalmente se asocia con la eucromatina transcripcionalmente activa y las regiones de cromatina abierta. Esta modificación está regulada dinámicamente por acetiltransferasas de histonas (HAT) y desacetilasas (HDAC), y contribuye a la regulación génica, el control del ciclo celular y el desarrollo. La acetilación de otras múltiples lisinas de H3 ha sido verificada experimentalmente y cumple funciones reguladoras similares.

Referencias relacionadas: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:16185088

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-100 de la Histona H3 humana, lo que puede conducir al reconocimiento de múltiples variantes de H3. Se recomienda verificar la especificidad para la isoforma diana en su sistema de muestras.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 15 kDa. Para obtener resultados óptimos, se recomiendan protocolos de extracción de histonas y controles de carga adecuados.
• Para las aplicaciones de IP y ChIP, valide el anticuerpo en sus condiciones específicas. En ChIP-seq, incluya controles de ADN de entrada e IgG inespecífico, y optimice la reticulación si es necesario.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), los métodos de fijación y permeabilización pueden influir en la accesibilidad del epitopo; pruebe diferentes protocolos para obtener la mejor relación señal-ruido.
• El anticuerpo tiene una reactividad cruzada amplia pronosticada (humano, ratón, rata y otros), pero confirme siempre su rendimiento en su configuración experimental.

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