Anticuerpo policlonal de conejo para Acetil-Histona H3-K9/K14/K18/K23/K27 (Q16695/P68431) para WB, IF/ICC y ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Histona H3

La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Como parte del octámero de histonas, cumple un papel esencial en el enrollamiento y compactación del ADN, limitando así la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular que requiere al ADN como molde. Esta base estructural permite que las histonas regulen de forma central la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.

La cola N-terminal de la Histona H3 está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales (MPT), que incluyen acetilación, metilación, fosforilación y otras, que constituyen un "código de histonas" complejo. Estas modificaciones controlan dinámicamente la arquitectura de la cromatina y la expresión génica. Específicamente, se sabe que la acetilación en los residuos de lisina 9, 14, 18, 23 y 27 neutraliza la carga positiva de las lisinas, debilitando la interacción entre las histonas y el ADN. Esto conduce a una conformación de cromatina más abierta (eucromatina) y está fuertemente asociada a la activación transcripcional. Las marcas de acetilación en estos sitios son reconocidas por proteínas que contienen bromodominios y remodeladores de cromatina, lo que facilita el reclutamiento de la maquinaria transcripcional. Referencias relacionadas:

• PMID:16627869
• PMID:19608861

La Histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y en los cromosomas, donde se incorpora a la cromatina durante la replicación del ADN (para variantes dependientes de la replicación como la H3.1) o de forma independiente a la replicación (para variantes de reemplazo). La proteína canónica H3.1 (codificada por múltiples genes, incluidos HIST1H3A–J) se expresa en muchos tejidos, mientras que la variante H3.1t específica de testículo (H3-4, codificada por HIST3H3) se encuentra en las células testiculares. Ambas variantes comparten la secuencia conservada de la cola N-terminal que contiene las lisinas acetiladas dirigidas por este anticuerpo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido acetilado sintético que abarca K9, K14, K18, K23 y K27 de la Histona H3 humana. Este diseño multisitio puede permitir una detección amplia de H3 hiperacetilada; se recomienda verificar la especificidad usando controles de péptido no acetilado en ensayos competitivos.
• Para Western blotting, la extracción ácida de histonas o el fraccionamiento enriquecido en cromatina puede mejorar las relaciones señal-ruido; se recomienda la normalización de la carga con un anticuerpo de Histona H3 total para tener en cuenta el posible enmascaramiento del epitopo por otras MPT.
• En inmunofluorescencia/ICC, la permeabilización con Tritón X-100 o digitonina puede mejorar la penetración del anticuerpo en el núcleo; las condiciones de fijación deben optimizarse para equilibrar la accesibilidad del epitopo y la morfología.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse de la inclusión de recubrimientos de péptido tanto acetilado como no acetilado para confirmar la unión selectiva.
• La reactividad cruzada predicha con humano, ratón, rata y otras especies sugiere su utilidad en múltiples sistemas modelo; sin embargo, es esencial la validación en el sistema de muestra y el contexto experimental específicos.

CamelBio: Tu puente de abastecimiento integral

CamelBio ofrece a fabricantes de diagnósticos, laboratorios e institutos de investigación una plataforma optimizada e integral para la adquisición de materias primas para IVD. Este anticuerpo contra acetil-Histona H3 forma parte de nuestra cartera centrada en epigenética y cromatina, complementando nuestra capacidad para suministrar pares de anticuerpos validados, reactivos monoclonales/policlonales optimizados, materiales auxiliares a granel y anticuerpos específicos para modificaciones poco frecuentes. Contacta a nuestro equipo para analizar cómo podemos apoyar tu desarrollo y producción de IVD — desde la concepción hasta la clínica — con soluciones integradas técnicas y de cadena de suministro.