Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Acetil-Histona H4-K16 (P62805) para aplicaciones de WB, ChIP e IHC-P

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H4

• Componente central del nucleosoma: La Histona H4 es un componente fundamental del nucleosoma, la unidad repetitiva básica de la cromatina. Envuelve y compacta el ADN, regulando así el acceso al material genético y desempeñando un papel central en la transcripción, reparación del ADN, replicación y estabilidad cromosómica. El estado dinámico de la cromatina está gobernado por una compleja serie de modificaciones postraduccionales (el "código de histonas") y el remodelado del nucleosoma. Referencias relacionadas: UniProt P62805

• Localización subcelular: La Histona H4 se localiza predominantemente en el núcleo y es un constituyente principal de los cromosomas. Las formas acetiladas, como las que involucran K16, se encuentran en contextos nucleares específicos, incluidos los núcleos de espermátidas en elongación. Referencias relacionadas: UniProt P62805

• Modificaciones postraduccionales y acetilación de K16: La Histona H4 está fuertemente modificada, especialmente en residuos de lisina. La acetilación en la lisina 16 (K16, correspondiente a la posición 17 en la secuencia procesada de UniProt) es una marca epigenética crítica. Esta modificación se asocia con cromatina abierta y regiones transcripcionalmente activas. Está dinámicamente regulada por histona acetiltransferasas (HATs) y desacetilasas (HDACs), y es reconocida por proteínas que contienen bromodominio para modular la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno para este anticuerpo es un péptido acetilado sintético alrededor de K16 de la Histona H4 humana, lo que garantiza especificidad para la forma acetilada. Siempre incluya controles apropiados (por ejemplo, competencia con péptido no acetilado o anticuerpo contra Histona H4 total) para confirmar la especificidad en su sistema experimental.
• Para Western blotting (WB), se espera una sola banda de aproximadamente 11 kDa. Considere optimizar las cantidades de carga y las condiciones de bloqueo para reducir la unión inespecífica.
• En inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), las condiciones de entrecruzamiento y fragmentación de la cromatina deben optimizarse cuidadosamente. El anticuerpo puede ser adecuado tanto para ChIP nativa como con entrecruzamiento; valide la recuperación de regiones genómicas conocidas acetiladas en K16.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), los métodos de recuperación de antígeno y la dilución del anticuerpo requerirán determinación empírica. La amplia reactividad cruzada predicha (humano, ratón, rata y otros) hace de este anticuerpo una herramienta versátil, pero los patrones de tinción deben verificarse con controles biológicos apropiados.
• La alta conservación evolutiva de la Histona H4 subyace a la amplia reactividad de especie predicha. Sin embargo, recomendamos validar el anticuerpo en su modelo específico de especie y tejido debido a posibles variaciones en la fijación o el procesamiento.

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