Policlonal de Conejo Anti-Acetil-Histona H4 (K8) (P62805) - WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP, ChIP-seq

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H4

La Histona H4 es un componente fundamental del nucleosoma, la unidad repetitiva básica de la cromatina. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN, limitando así la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares que necesitan al ADN como molde. A través de estas interacciones, las histonas desempeñan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.

La accesibilidad del ADN está regulada por un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (MPT) en las histonas, denominadas colectivamente el "código de histonas", así como por la remodelación de nucleosomas. La Histona H4 se modifica extensamente, especialmente en su cola N-terminal, con marcas que incluyen acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y ubiquitinación.

La acetilación en la lisina 8 (K8) de la histona H4 —que corresponde a la posición 9 en la secuencia de UniProt (P62805)— es una modificación bien caracterizada asociada a cromatina abierta y activación transcripcional. Esta modificación está regulada dinámicamente por las histona acetiltransferasas (HAT) y desacetilasas (HDAC). Referencias relacionadas: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

La Histona H4 se localiza principalmente en el núcleo y en los cromosomas. En ciertos tipos de células, como los espermátides, se observa que la H4 acetilada se concentra en el núcleo durante etapas específicas del desarrollo.

La Histona H4 está codificada por múltiples copias génicas, incluidas HIST1H4A hasta HIST1H4L, HIST2H4A/B y HIST4H4, que producen secuencias proteicas idénticas. Esta alta conservación entre especies sustenta su amplia reactividad cruzada predicha.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para ChIP y ChIP-seq, considere optimizar las condiciones de reticulación y fragmentación de cromatina para preservar la modificación acetilada lábil. El uso de inhibidores de desacetilasas de histonas (por ejemplo, butirato de sodio, TSA) durante la recolección de células puede mejorar la detección.
• En Western blotting (WB), se recomienda incluir tanto el péptido de acetil-histona H4 como el péptido no acetilado como controles de bloqueo para confirmar la especificidad del anticuerpo.
• Debido a que la histona H4 está altamente conservada, se espera que este anticuerpo tenga reactividad cruzada con una amplia gama de especies; sin embargo, es aconsejable realizar la validación en el sistema de muestra correspondiente.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), los protocolos de fijación y permeabilización deben evaluarse cuidadosamente, ya que el epítopo acetilado puede ser sensible a tratamientos agresivos.
• Cuando utilice este anticuerpo, se debe monitorear la consistencia entre lotes, especialmente en ensayos cuantitativos, como es estándar para los reactivos policlonales.

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