Anticuerpo policlonal de conejo anti-Acetil-Histona H4 K91 (P62805) – WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H4

La histona H4 es una de las histonas centrales que forman el nucleosoma, la unidad fundamental de la cromatina. Junto con H2A, H2B y H3, envuelve el ADN alrededor del octámero de histonas, compactando el genoma y regulando el acceso para la transcripción, replicación y reparación. La histona H4 juega un papel central en la regulación dinámica de la estructura de la cromatina a través de una amplia gama de modificaciones postraduccionales (PTM), conocidas colectivamente como el "código de histonas". Estas modificaciones incluyen acetilación, metilación, fosforilación, ubiquitinación y muchas otras, que ocurren predominantemente en la cola N-terminal pero también en el dominio globular.

La acetilación de residuos de lisina específicos en la histona H4 se asocia con la activación transcripcional y la estructura de cromatina abierta. La lisina 91 (K91), ubicada dentro del dominio globular de H4, es uno de esos residuos que puede ser acetilado. Se ha demostrado que la acetilación en K91 (correspondiente a K92 en la isoforma UniProt P62805) regula la dinámica de la cromatina y puede influir en los procesos de reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:19818714

La naturaleza altamente conservada de la histona H4 en los eucariotas garantiza que los anticuerpos específicos de acetilación como este anti-acetil-H4-K91 exhiban una amplia reactividad cruzada, convirtiéndolos en herramientas valiosas para estudios epigenéticos en múltiples especies. H4 se localiza predominantemente en el núcleo, asociada con los cromosomas, y está presente a lo largo del ciclo celular, con patrones de acetilación específicos que cambian durante la diferenciación y el desarrollo. Referencias relacionadas: UniProt P62805

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot (WB), utilice extractos nucleares enriquecidos en histonas o histonas extraídas con ácido para mejorar la detección. Considere incluir un control negativo, como un péptido no acetilado o un tratamiento con un inhibidor de desacetilasa (por ejemplo, TSA), para confirmar la especificidad para la forma acetilada K91. El peso molecular previsto de la histona H4 es aproximadamente 11 kDa, pero la migración puede variar ligeramente dependiendo de las PTM.
• En inmunofluorescencia / inmunocitoquímica (IF/ICC), optimice las condiciones de fijación y permeabilización (por ejemplo, fijación con PFA al 4% o metanol, seguida de 0.1% Triton X-100) para preservar el epítopo. La tinción conjunta con colorantes de ADN (por ejemplo, DAPI) puede confirmar la localización nuclear.
• Para aplicaciones ELISA, utilice péptido sintético K91 acetilado versus péptido no modificado como antígenos de recubrimiento para evaluar la especificidad y el título del anticuerpo. Se prevé que este anticuerpo reaccione de forma cruzada con ratón, rata y otras especies debido a la alta homología de secuencia de la histona H4, pero verifíquelo en su sistema experimental.

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