Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Acetil-p53 (K370) (P04637) para Western Blot y ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de p53 (TP53)

p53 (Antígeno tumoral celular p53, TP53) es una proteína supresora de tumores bien caracterizada que funciona como un factor de transcripción multifuncional. Induce la detención del ciclo celular, la reparación del ADN o la apoptosis al unirse a sus secuencias de ADN diana, manteniendo así la estabilidad genómica y previniendo el desarrollo del cáncer (PubMed:11025664, 12524540, 12810724, 15340061, 17317671, 24051492).

Referencias relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:17317671, PMID:24051492

Los estudios de localización subcelular muestran que p53 es predominantemente nuclear en condiciones normales, pero puede translocarse al citoplasma, mitocondrias, cuerpos PML y retículo endoplásmico en respuesta a diversos tipos de estrés celular. Esta compartimentalización dinámica es crítica para sus diversas funciones, incluida la regulación de la transcripción y la inducción de la apoptosis (PubMed:15340061, 22726440, 11025664, 12810724, 17170702, 25168243, 27323408, 28842590).

Referencias relacionadas: PMID:15340061, PMID:22726440, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:17170702, PMID:25168243, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 se expresa de forma ubicua en la mayoría de los tejidos, con múltiples isoformas que exhiben patrones de expresión distintos. La isoforma principal 1 se expresa ampliamente, mientras que otras isoformas muestran presencia o ausencia específica de tejido, añadiendo una capa de complejidad regulatoria (PubMed:16131611).

Referencias relacionadas: PMID:16131611

La actividad de p53 está estrictamente controlada por extensas modificaciones postraduccionales (PTM), que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación. La lisina 370 (K370) en el dominio regulatorio C-terminal es un punto caliente para tales modificaciones, experimentando metilación y dimetilación por enzimas como SMYD2 y otras, lo que modula la estabilidad y la actividad transcripcional de p53. Este anticuerpo se generó utilizando un péptido sintético acetilado alrededor de K370 de p53 humana (P04637), reconociendo específicamente la forma acetilada en este residuo. La acetilación en K370 se asocia con una mayor unión al ADN y la activación de genes diana de p53, vinculándola con la supresión tumoral.

Referencias relacionadas: PMID:17108971, PMID:22864287 (Para metilación/dimetilación en K370)

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó en conejo y es monoclonal, lo que garantiza alta especificidad y consistencia entre lotes.
• Para Western blot, considere enriquecer extractos de proteínas nucleares, ya que p53 es predominantemente nuclear; sin embargo, dependiendo de las condiciones de estrés celular, p53 también puede estar presente en fracciones citoplasmáticas o mitocondriales.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en muestras de control positivo conocidas por expresar p53 acetilada, como células tratadas con inhibidores de deacetilasas (por ejemplo, ácido tricostatín A o nicotinamida) o agentes que dañan el ADN (por ejemplo, etopósido, doxorrubicina).
• Cuando utilice ELISA, recubra la placa con el péptido inmunógeno (acetilado) y un péptido control no acetilado para confirmar la especificidad.
• La reactividad cruzada está confirmada para humano y ratón, pero considere la alineación de secuencias si prueba otras especies.
• Optimice las diluciones de trabajo empíricamente; diluciones iniciales recomendadas para WB: 1:500‑1:2000, para ELISA: 1:1000‑1:5000 (a titular por el usuario final).

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