Anticuerpo Policlonal de Conejo Acetil-p53-K382 (P04637) para Dot Blot y ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del Antígeno de Tumores Celular p53 (TP53)

El antígeno de tumores celular p53 (TP53) es un factor de transcripción multifuncional que desempeña un papel central en la supresión de tumores al inducir la detención del ciclo celular, la reparación del ADN o la apoptosis en respuesta al estrés celular. Actúa como guardián del genoma, regulando negativamente la división celular al controlar la expresión de genes diana clave, incluidos los inhibidores de las quinasas dependientes de ciclinas. La apoptosis mediada por p53 implica la estimulación de la expresión de los antígenos BAX y FAS o la represión de Bcl-2, y su actividad proapoptótica es modulada por interacciones con proteínas de la familia ASPP. Además, p53 regula el reloj circadiano al reprimir la transcripción mediada por CLOCK-BMAL1 de PER2. Referencias relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:24051492

p53 se localiza en múltiples compartimentos subcelulares dependiendo de su estado de activación e isoforma. Se encuentra predominantemente en el núcleo, pero también puede hallarse en el citoplasma, en los cuerpos nucleares PML, las mitocondrias, el retículo endoplasmático y el centrosoma. La translocación a las mitocondrias ocurre bajo estrés oxidativo o tratamiento con mitomicina C, donde p53 coopera con PPIF para activar la necrosis. Referencias relacionadas: PMID:15340061, PMID:17170702, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:22726440, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 se expresa ubicuamente, pero sus isoformas muestran variación dependiente del tejido. La isoforma 2 está ausente en cerebro, pulmón y próstata, mientras que la isoforma 8 se limita al colon, la médula ósea, el testículo, el cerebro fetal y el intestino. Referencias relacionadas: PMID:16131611

p53 sufre extensas modificaciones postraduccionales que regulan su estabilidad y actividad. La acetilación en la lisina 382 (K382) está mediada por acetiltransferasas como p300/CBP y mejora la unión de p53 al ADN y su activación transcripcional. Esta modificación puede ser revertida por desacetilasas, y K382 también puede ser metilada o dimetilada, lo que destaca una compleja red reguladora. Referencias relacionadas: PMID:10656795, PMID:15448695, PMID:20228809, PMID:23431171, PMID:29681526, PMID:19608861, PMID:17707234, PMID:20870725, PMID:22864287

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido acetilado sintético que corresponde a los residuos alrededor de K382 de la p53 humana. Se espera que el anticuerpo reconozca específicamente la forma acetilada; debe probarse la reactividad cruzada con el péptido no modificado u otras modificaciones en este sitio.
• Para aplicaciones de dot blot, considere el uso de muestras de proteínas desnaturalizadas o péptidos fijados en membranas. Para ELISA, la recubrimiento con el péptido inmunógeno o la proteína p53 de longitud completa puede ser adecuado.
• Dado que los anticuerpos policlonales pueden presentar variaciones entre lotes, valide la especificidad del anticuerpo en su sistema experimental utilizando los controles apropiados (por ejemplo, competencia con péptido no acetilado o lisados de células tratadas con inhibidores de desacetilasas como el ácido tricostatina A).
• La inducción de la acetilación de p53 puede lograrse tratando las células con agentes dañinos del ADN (por ejemplo, doxorrubicina, etopósido) antes de la preparación de la muestra.
• El anticuerpo se envía en bolsas de hielo. Al recibirlo, alícuotelo y almacénelo a –20°C o menos para su estabilidad a largo plazo. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

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