Anticuerpo policlonal de conejo anti-AARS/AARS1 para WB, IF/ICC, IHC-P y ELISA - P49588

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la alanina-ARNt ligasa citoplasmática

• La alanina-ARNt ligasa citoplasmática (AARS1/AARS), también conocida como alanil-ARNt sintetasa (AlaRS), es una enzima multifuncional codificada por el gen AARS1.
• Su función canónica consiste en catalizar la unión dependiente de ATP de la alanina a su ARNt(Ala correspondiente, un paso esencial para la traducción de proteínas. También posee un dominio de edición que hidroliza el ARNt(Ala cargado incorrectamente. Referencias relacionadas: PMID:27622773, PMID:27911835, PMID:28493438
• En condiciones de alta concentración de lactato, AARS1 actúa también como lactiltransferasa de proteínas, transfiriendo grupos lactilo a residuos de lisina de las proteínas diana. Esta actividad no canónica regula factores de transcripción como TP53/p53, TEAD1 y YAP1. Referencias relacionadas: PMID:38512451, PMID:38653238, PMID:39322678
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, en consonancia con sus funciones en la traducción y la regulación transcripcional.
• Las modificaciones postraduccionales de AARS1 incluyen acetilación, fosforilación, metilación y ubiquitinación, que pueden modular sus actividades enzimáticas e interacciones.
• Las mutaciones en AARS1 se asocian con un espectro de trastornos neurológicos, incluida la enfermedad de Charcot-Marie-Tooth de tipo 2N (CMT2N), la encefalopatía epiléptica y del desarrollo 29 (DEE29) y la leucodistrofia hipomielinizante (HDLS2), lo que pone de manifiesto su importancia en la homeostasis neuronal.
• Requiere zinc y ATP como cofactores para sus funciones de aminoacilación y edición.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1–100 del extremo N-terminal de AARS humana. Esta región puede estar sujeta a modificaciones postraduccionales; verifique la detección de las formas modificadas en su sistema experimental.
• Para la transferencia Western, el peso molecular esperado es de aproximadamente 107 kDa. La AARS1 endógena se expresa de forma ubicua; asegúrese de cargar una cantidad suficiente para los tejidos con menor expresión.
• En inmunocitoquímica/inmunofluorescencia (ICC/IF), la fijación con paraformaldehído suele ser compatible. Dado que AARS1 se desplaza entre el núcleo y el citoplasma, la localización celular puede variar según el estado metabólico, por ejemplo, los niveles de lactato.
• Para la inmunohistoquímica (IHC), deben optimizarse las condiciones de recuperación antigénica debido al epítopo N-terminal. Considere utilizar un tampón a base de citrato a pH 6,0.
• Al utilizarlo para ELISA, combínelo con un anticuerpo de captura o detección validado para garantizar la especificidad.

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