Anticuerpo policlonal de conejo Anti-ABCA2 para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9BZC7

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ABCA2

• ABCA2 (miembro 2 de la subfamilia A del casado de unión a ATP), también conocido como transportador de casete de unión a ATP 2 o ABC2, es un miembro de la superfamilia de transportadores ABC involucrado en la translocación dependiente de ATP de sustratos a través de las membranas.
• Funciona como un transportador de lípidos probable que modula el secuestro de colesterol en el endosoma tardío/lisosoma al regular el metabolismo intracelular de esfingolípidos, participando en la homeostasis del colesterol. Referencias relacionadas: PMID:15238223, PMID:21810484, PMID:24201375
• ABCA2 puede alterar la distribución transbicapa de la ceramida en las bicapas de membrana intraluminales, favoreciendo su retención en la hoja externa y conduciendo a un aumento de la actividad de la ceramidasa ácida, lo que facilita la desacilación de la ceramida a esfingosina y el secuestro de colesterol libre lisosomal. Referencias relacionadas: PMID:24201375
• La proteína también participa en la regulación de la producción de beta amiloide (Aβ), ya sea modulando el metabolismo de esfingolípidos para afectar la transcripción de la proteína precursora de amiloide (APP) o a través de su papel en el procesamiento de APP por la γ-secretasa. Referencias relacionadas: PMID:22086926, PMID:26510981
• ABCA2 puede desempeñar un papel en la formación de mielina (por similitud).
• Subcelularmente, ABCA2 se localiza principalmente en las membranas de endosomas y lisosomas.
• El análisis de expresión tisular muestra niveles altos en cerebro, leucocitos de sangre periférica y ovario, con expresión más baja en riñón e hígado.
• Las modificaciones post-traduccionales incluyen glicosilación, fosforilación y metilación; la proteína presenta dos dominios de unión a ATP y múltiples hélices transmembrana, lo que coincide con su función de transportador.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 140–350) se encuentra dentro de la región N-terminal de ABCA2 humana; los usuarios deben verificar la identidad de secuencia con la especie objetivo si se espera reactividad cruzada más allá de humano, ratón y rata.
• Para Western blot, debido al gran tamaño de la proteína (~270 kDa), utilice un gel de poliacrilamida de alto porcentaje (por ejemplo, 6–8%) y tiempos de transferencia extendidos para un blotting eficiente.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, los protocolos de fijación y permeabilización deben optimizarse para detectar proteínas de membrana endosomal/lisosomal; considere utilizar permeabilización basada en metanol o detergente.
• El rendimiento de ELISA se puede evaluar utilizando fragmentos recombinantes de ABCA2 o lisados celulares; el ELISA indirecto puede ser adecuado para la determinación de títulos.
• Al analizar tejidos de ratón o rata, confirme la reactividad cruzada mediante la alineación de secuencias de la región del inmunógeno y considere utilizar controles positivos apropiados.

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