Anticuerpo monoclonal anti-Acetil-CoA Carboxilasa para WB, IP, ELISA - Q13085 / O00763

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Acetil-CoA Carboxilasa 1

• La acetil-CoA carboxilasa 1 (ACC1) es una enzima citosólica dependiente de biotina que cataliza la carboxilación dependiente de ATP de acetil-CoA a malonil-CoA, el primer paso limitante de la biosíntesis de novo de ácidos grasos. Referencias relacionadas: PMID:20457939, PMID:20952656, PMID:29899443
• La reacción procede en dos etapas: carboxilación dependiente de ATP del grupo prostético biotina en el dominio transportador de biotina carboxilo (BCC), seguida de la transferencia del grupo carboxilo a la acetil-CoA.
• ACC1 es una enzima multifuncional con dominios de biotina carboxilasa (BC), proteína transportadora de biotina carboxilo (BCCP) y carboxiltransferasa (CT), que permiten su actividad catalítica compleja.
• Su localización subcelular es principalmente citoplasmática y citosólica, lo que concuerda con su función en la síntesis citosólica de ácidos grasos.
• Expresión tisular: ACC1 se expresa en tejidos cerebrales, placentarios, músculo esquelético, riñón, páncreas y tejido adiposo; su expresión es baja en tejido pulmonar y no se detecta en el hígado.
• La enzima está regulada estrictamente por fosforilación (por ejemplo, por AMPK), efectores alostéricos (activación por citrato, inhibición por palmitoil-CoA) y el uso de promotores alternativos, lo que resalta su papel central en el control metabólico.
• ACC2 (codificado por ACACB) es una isoforma mitocondrial que genera malonil-CoA para inhibir la carnitina palmitoiltransferasa I, regulando la oxidación de ácidos grasos; el anticuerpo puede reconocer tanto ACC1 como ACC2 debido a la homología de secuencia.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 500–600 de la ACC1 humana (NP_942133.1), una región que probablemente comparte con ACC2; se recomienda validar la especificidad de isoforma en el sistema de muestras correspondiente.
• Para WB, debido al alto peso molecular de ACC1 (265 kDa) y ACC2 (276 kDa), utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6–8%) y tiempos de transferencia prolongados; incluya marcadores de alto peso molecular preteñidos.
• Verifique el rendimiento del anticuerpo en su especie y aplicación; aunque está validado en humano, ratón y rata, la reactividad cruzada en otras especies o formatos de ensayo debe confirmarse empíricamente.
• Para IP, optimice la concentración de anticuerpo y utilice sistemas de perlas adecuados (por ejemplo, proteína A/G); tenga en cuenta el impacto de la biotinilación o la biotina endógena en la detección.
• En ELISA, combine este anticuerpo con un reactivo de detección de ACC adecuado; pruebe la especificidad con controles de proteína recombinante ACC1 o ACC2.

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