Anticuerpo Policlonal Anti-ADAM10 para WB, IF/ICC, FC, ELISA - O14672

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ADAM10

• ADAM10, también conocida como Kuzbanian o CDw156, es un miembro de la familia ADAM (una desintegrina y metaloproteasa) y funciona como una metaloproteasa transmembrana involucrada en el desprendimiento del ectodominio de diversos sustratos.
• Escinde el precursor de la proteína alfa del factor de necrosis tumoral (TNF-alfa) unida a membrana para liberar TNF soluble, un paso crítico en la señalización inflamatoria. Referencias relacionadas: PMID:20592283
• ADAM10 sirve como la alfa-secretasa para la proteína precursora de amiloide (APP), reduciendo la producción de amiloide-beta y vinculándola con la patología de la enfermedad de Alzheimer. Referencias relacionadas: PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• También desprende otras moléculas de adhesión y receptores como CD44, cadherinas, efrínas y ligandos de Notch, regulando así la adhesión celular, la migración y las vías de señalización del desarrollo.
• Subcelularmente, ADAM10 se localiza en la membrana plasmática, el aparato de Golgi, vesículas recubiertas de clatrina y uniones celulares (uniones adherentes), así como en proyecciones neuronales como axones y dendritas.
• La proteína sufre un procesamiento postraduccional complejo, que incluye glicosilación, formación de enlaces disulfuro y escisión de su prodominio para generar la proteasa activa.
• ADAM10 se expresa ampliamente, con altos niveles en cerebro, tejidos linfoides (bazo, ganglio linfático, timo), médula ósea y cartílago, acorde con sus funciones en la neurogénesis y la función inmunitaria. Referencias relacionadas: PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El immunógeno es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 214–672 de ADAM10 humano, cubriendo dominios extracelulares clave; el anticuerpo puede reconocer tanto las formas de longitud completa como las escindidas.
• En Western blot, espere una banda principal cerca de 84 kDa para la proteína de longitud completa; pueden aparecer bandas adicionales debido al desprendimiento o activación. Optimice los controles de carga y valide con sus lisados de muestra específicos.
• Para inmunofluorescencia/ICC, pruebe tanto condiciones permeabilizadas como no permeabilizadas para comparar patrones de tinción superficial versus intracelular.
• En citometría de flujo, valore cuidadosamente el anticuerpo y utilice controles isotipo para tener en cuenta el fondo, especialmente al analizar células con expresión variable de ADAM10.
• Al realizar ELISA, considere emparejarlo con un anticuerpo de captura específico para un epítopo diferente o utilice ADAM10 recombinante como estándar para asegurar la cuantificación.
• Dado que se informa que este anticuerpo reacciona de forma cruzada con ADAM10 de rata, verifique la reactividad en sus muestras derivadas de rata; para otras especies, consulte la homología de secuencia y realice pruebas piloto.

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