Anticuerpo Policlonico Anti-ADAMTS5 para WB, ELISA - Q9UNA0

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ADAMTS5

• ADAMTS5, también conocido como agrecansasa-2, ADAM-TS 11 o ADMP-2, es una metaloproteinasa secretada que pertenece a la familia ADAMTS de proteasas extracelulares.
• ADAMTS5 funciona como una enzima degradadora de la matriz extracelular (MEC) que presenta actividad proteolítica sobre los proteoglicanos de condroitín sulfato hialectanos (CSPG), incluidos ACAN, VCAN, BCAN y NCAN, desempeñando un papel clave en el recambio del cartílago y la remodelación del tejido conectivo. Referencias relacionadas: PMID:16133547 PMID:18992360
• La proteína se localiza en el espacio extracelular y la matriz extracelular, donde remodela los entornos pericelulares durante el desarrollo y el mantenimiento tisular.
• ADAMTS5 contiene dominios de metaloproteasa, desintegrina y repetición de trombospondina tipo 1; la actividad catalítica requiere unión a zinc, y la enzima se produce inicialmente como zimógeno.
• Se detecta expresión tisular a bajos niveles en placenta, corazón, cerebro, cuello uterino, útero, vejiga, esófago y cartílago, con mayor abundancia en cápsulas articulares artríticas.
• Mediante la escisión de versicán, ADAMTS5 contribuye a la morfogénesis embrionaria de las extremidades y el corazón, y facilita la fusión de mioblastos durante el desarrollo y la regeneración del músculo esquelético.
• ADAMTS5 también participa en la migración de linfocitos T desde los ganglios linfáticos drenantes después de una infección viral.
• La proteína sufre escisión en pares de residuos básicos y contiene múltiples enlaces disulfuro y sitios de glicosilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético dentro de los aminoácidos 601–700 de ADAMTS5 humana (NP_008969.2). Al diseñar estrategias de detección, verifique que la secuencia diana esté conservada en su especie de interés, ya que se informa de reactividad cruzada para humano, ratón y rata.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 101 kDa. Optimice el porcentaje de gel (por ejemplo, 8–10% de poliacrilamida) y las condiciones de transferencia para garantizar una transferencia eficiente de esta proteína de tamaño relativamente grande. Incluya un lisado de control positivo de tejido de placenta o cartílago.
• Debido a que se trata de un anticuerpo policlonico, puede reconocer múltiples epítopos; confirme la especificidad mediante detección paralela con un método independiente (por ejemplo, silenciamiento por siRNA o competición por antígeno) si es necesario.
• Para ELISA, párelo con un anticuerpo de detección adecuado y considere utilizar ADAMTS5 recombinante o extractos tisulares como antígeno de captura. Titule el anticuerpo para determinar una concentración de trabajo óptima.
• Aunque el fabricante ha validado el anticuerpo para WB y ELISA, el rendimiento en otras aplicaciones (por ejemplo, IHC, IF) debe probarse empíricamente en las condiciones de muestra y tampón correspondientes.

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