Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ADRA1A para WB, ELISA - P35348

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ADRA1A

• ADRA1A (receptor adrenérgico alfa-1A) es un receptor acoplado a proteína G que media la señalización de catecolaminas a través de proteínas G de la familia G(q), activando la vía del segundo mensajero fosfatidilinositol-calcio y la proteína quinasa C (PubMed:37563160).
  Referencias relacionadas: PMID:37563160
• Se une a los ligandos catecolamínicos norepinefrina y epinefrina, y también puede acoplarse a la proteína G(14), lo que indica una amplia capacidad de señalización (PubMed:18802028, PubMed:37563160, PubMed:7815325).
  Referencias relacionadas: PMID:18802028, PMID:37563160, PMID:7815325
• El ADRA1A localizado en el núcleo forma hetero-oligómeros con ADRA1B para regular la señalización de ERK estimulada por fenilefrina en los miocitos cardíacos y, en la membrana plasmática, interactúa con CAVIN4/MURC para regular la activación de ERK y la hipertrofia cardíaca (PubMed:18802028, PubMed:22120526, PubMed:24567387).
  Referencias relacionadas: PMID:18802028, PMID:22120526, PMID:24567387
• ADRA1A desempeña un papel vasopresor fundamental en las arterias de resistencia y participa en el mantenimiento de la presión arterial normal.
• El receptor se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluidos la membrana nuclear, la membrana celular, el citoplasma y las caveolas, lo que refleja sus complejas modalidades de señalización.
• Se expresa en el corazón, el cerebro, el hígado y la próstata, siendo la isoforma 4 la más abundante en la próstata, el hígado y el corazón.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro, la glicosilación, la palmitoilación y la fosforilación, que modulan la actividad y el transporte del receptor.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 150-250 de ADRA1A humano (P35348). Esta región se encuentra dentro del tercer bucle intracelular, que es importante para el acoplamiento a proteínas G y puede afectar al reconocimiento del anticuerpo de las conformaciones del receptor. Considere utilizar condiciones desnaturalizantes (por ejemplo, WB con SDS-PAGE) para garantizar el acceso a los epítopos lineales.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 51 kDa para la isoforma canónica; sin embargo, el splicing alternativo y las modificaciones postraduccionales (glicosilación, fosforilación) pueden producir bandas de mayor peso molecular o múltiples bandas. Valide la especificidad de las bandas utilizando controles adecuados (por ejemplo, péptido bloqueante o lisados de knockout).
• En ELISA, el anticuerpo puede detectar la proteína desnaturalizada o nativa dependiendo de las condiciones de recubrimiento. Optimice el tampón de recubrimiento y la presentación del antígeno para adaptarlos al formato del ensayo.
• Se ha informado de reactividad cruzada en humanos y ratones; confirme la reactividad en su especie experimental si es diferente de estas. Los niveles de expresión endógena de ADRA1A pueden variar según el tejido; considere utilizar sistemas de sobreexpresión para la detección inicial.

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