Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Aggrecan para WB, IHC, IF, ELISA - P16112

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del Aggrecan

• La proteína central del Aggrecan (AGC1, CSPG1, ACAN) es un proteoglicano de condroitín sulfato grande y un componente estructural principal de la matriz extracelular del cartílago.
• Media la resistencia a las fuerzas de compresión en el cartílago articular y mantiene la hidratación del tejido y sus propiedades de soporte de carga.
• El Aggrecan se une ávidamente al ácido hialurónico a través de su dominio globular N-terminal, formando agregados supramoleculares masivos críticos para la integridad del cartílago.
• El Aggrecan se expresa predominantemente en el cartílago (PubMed:7524681) y también se ha detectado a nivel de proteína en fibroblastos (PubMed:36213313). Referencias relacionadas: PMID:7524681 PMID:36213313
• La proteína se secreta y se localiza principalmente en la matriz extracelular de los tejidos cartilaginosos.
• El Aggrecan pertenece a la familia de proteoglicanos aggrecan/versican y contiene dominios tipo inmunoglobulina, dominios de enlace y un dominio de lectina tipo C.
• Se generan múltiples isoformas por empalme alternativo y la proteína central está fuertemente glicosilada con cadenas laterales de condroitín sulfato y queratán sulfato.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro, unión de calcio y glicosilación O‑; la proteína madura tiene un dominio tipo EGF y motivos de repetición sushi.
• Las mutaciones en el gen humano ACAN se asocian con displasias esqueléticas y fenotipos de enanismo, lo que subraya su papel esencial en el desarrollo y la función del cartílago.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 420–575 del aggrecan humano, una región ubicada entre los dominios G1 y G2; tenga en cuenta que este dominio interglobular puede ser susceptible a la proteólisis en lisados de tejidos.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el gran tamaño del aggrecan (~261 kDa) y su glicosilación extensa pueden hacer necesario un SDS‑PAGE en gradiente (p. ej., 4–20%) y tiempos de transferencia prolongados; considere la desglicosilación para mejorar la resolución de las bandas.
• En inmunohistoquímica (incluido en parafina), la recuperación de antígenos con condroitinasa ABC o hialuronidasa puede desenmascarar epítopos al eliminar las voluminosas cadenas laterales de GAG.
• Para ELISA, el recubrimiento con aggrecan recombinante o extractos de cartílago tratados con condroitinasa puede mejorar la sensibilidad; la naturaleza policlonal del anticuerpo puede proporcionar una señal robusta en ensayos tipo sándwich.

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