Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Agrin para WB, IF/ICC, ELISA - O00468

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Agrin

• La Agrin es un proteoglicano de heparán sulfato grande que existe como múltiples isoformas generadas por splicing alternativo, donde las formas secretadas y transmembranales desempeñan funciones distintas en la formación de la unión neuromuscular (NMJ), la diferenciación sináptica y el crecimiento de neuritas.
• En la NMJ, la agrin es un organizador clave: se une a LRP4 para activar el receptor MUSK, desencadenando la diferenciación postsináptica y la agrupación de receptores de acetilcolina (AChR), un proceso esencial para la función sináptica. Referencias relacionadas: PMID:21969364
• La Agrin regula positivamente la formación del cartílago al unirse a la α-distroglicana y aumentar la expresión del factor de transcripción SOX9, un regulador crítico de la diferenciación de los condrocitos. Referencias relacionadas: PMID:26290588
• Las isoformas z+ específicas de neuronas contienen inserciones cortas en el extremo C-terminal (8-19 aminoácidos) y son potentes activadoras de la agrupación de AChR; los factores de splicing NOVA1 y NOVA2 controlan la inclusión de estas inserciones.
• La proteína se localiza en la matriz extracelular, la membrana basal y la hendidura sináptica, y una fracción está anclada a la membrana como proteína transmembranal; se expresa en el pulmón, el riñón, el músculo, las neuronas y el cartílago articular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una glicosilación extensa, la unión de cadenas de glicosaminoglicanos de heparán sulfato y condroitín sulfato, y la fosforilación, que modulan su señalización y estabilidad.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 30-350) común a múltiples isoformas, este anticuerpo policlonal puede detectar diversas variantes de splicing de la agrin. Considere confirmar la especificidad de la isoforma utilizando controles específicos de la isoforma o análisis de secuencia.
• Para Western blot, el peso molecular predicho de la agrin de longitud completa es de ~217 kDa; sin embargo, el procesamiento proteolítico produce fragmentos más pequeños (p. ej., C‑terminal de 22 kDa, N‑terminal de 110 kDa). Tenga esto en cuenta al interpretar los patrones de bandas.
• En IF/ICC, la agrin se localiza en la superficie celular, la matriz extracelular y las sinapsis; considere utilizar condiciones de permeabilización optimizadas para proteínas asociadas a la membrana e incluya los controles adecuados.
• Este anticuerpo es adecuado para aplicaciones de ELISA; valide la linealidad y la sensibilidad con agrin recombinante o lisados de tejidos relevantes.

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