Anticuerpo policlonal Anti-AK4 para WB, IP, ELISA - P27144

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AK4

• AK4, también conocida como adenilato quinasa 3 similar o GTP:AMP fosfotransferasa, es una enzima mitocondrial codificada por el gen AK4 (GeneID: 205) que pertenece a la familia de las adenilato quinasas.
• Funciona como una nucleósido fosfato quinasa mitocondrial de especificidad amplia, manteniendo la homeostasis de nucleótidos celulares al catalizar las interconversiones de nucleósido-fosfato. Referencias relacionadas: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 fosforila preferentemente AMP a ADP usando ATP como donante de fosfato; también puede usar GTP como donante de fosfato alternativo para la fosforilación de AMP. Referencias relacionadas: PMID:19766732
• In vitro, AK4 exhibe una especificidad de sustrato más amplia, fosforilando CMP, dAMP y dCMP, y usando GTP como donante alternativo. Referencias relacionadas: PMID:19766732 PMID:23416111
• La enzima también posee actividad difosfato quinasa, generando ATP, CTP, GTP, UTP, TTP, dATP, dCTP y dGTP a partir de sus difosfatos correspondientes. Referencias relacionadas: PMID:23416111
• AK4 juega un papel fundamental en la regulación de los niveles celulares de ATP al modular la fosforilación y activación del sensor energético AMPK. Referencias relacionadas: PMID:24767988 PMID:26980435
• Tiene una función protectora en la respuesta celular al estrés oxidativo, contribuyendo a la resistencia mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:26980435
• A nivel subcelular, AK4 se localiza en la matriz mitocondrial, lo que coincide con su papel en el metabolismo de nucleótidos mitocondrial.
• La expresión tisular es mayor en riñón, moderada en corazón e hígado, y baja en cerebro, lo que refleja su importancia en tejidos con alta demanda energética.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los 223 aminoácidos del extremo N-terminal de la AK4 humana, que cubre el dominio conservado de adenilato quinasa. Esta región presenta una alta homología entre humanos y ratones, lo que explica la reactividad cruzada observada.
• Para el análisis de Western blot (WB), use lisados de tejido de riñón o hígado como controles positivos. Considere una dilución inicial de 1:500-1:2000 y valide con marcadores de peso molecular adecuados (~25 kDa).
• La inmunoprecipitación (IP) puede beneficiarse de fracciones enriquecidas en mitocondrias para aumentar la abundancia del objetivo. Optimice la cantidad de anticuerpo y las condiciones de incubación de forma empírica.
• Para aplicaciones de ELISA, recubra con proteína AK4 recombinante como estándar y realice una titulación del anticuerpo. La combinación con un anticuerpo de detección requiere una validación cuidadosa.
• Dado que AK4 es una proteína de la matriz mitocondrial, considere el uso de fraccionamiento subcelular o tinciones específicas de orgánulos para aumentar la especificidad de la señal.

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