Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-AKT1 (fosfo T308) para WB, ELISA - P31749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AKT1

• AKT1 es un miembro de la familia de quinasas serina/treonina AKT, que también incluye AKT2 y AKT3, y regula procesos celulares críticos como el metabolismo, la proliferación, la supervivencia, el crecimiento y la angiogénesis (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Referencias relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 promueve la supervivencia celular al fosforilar MAP3K5 en Ser-83, lo que inhibe la actividad quinasa de MAP3K5 en respuesta al estrés oxidativo, evitando así la apoptosis (PubMed:11154276). Referencias relacionadas: PMID:11154276
• En la señalización de la insulina, AKT1 media la síntesis de proteínas y el crecimiento celular al fosforilar TSC2 en Ser-939 y Thr-1462, lo que conduce a la activación de la vía mTORC1 (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Referencias relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fosforila los factores de transcripción FOXO, incluido FOXO1 en Thr-24, Ser-256 y Ser-319, induciendo la unión de proteínas 14-3-3 y la retención citoplásmica, inhibiendo así sus funciones pro-apoptóticas (PubMed:10358075). Referencias relacionadas: PMID:10358075
• La proteína se localiza en el citoplasma, núcleo, membrana celular y espacio intermembrana mitocondrial, lo que refleja sus múltiples funciones regulatorias.
• AKT1 se expresa en todos los tipos de células humanas, observándose una mayor expresión en el cáncer de próstata y una elevada fosforilación en Tir-176 en etapas progresivas de cáncer de mama.
• La fosforilación en Thr308 es un evento crítico para la activación de la quinasa AKT1, y sirve como un marcador clave de la actividad de la vía PI3K en aplicaciones de investigación y diagnóstico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de Thr308 de la AKT1 humana; valide la especificidad comparando las señales con y sin tratamiento con fosfatasa.
• Para Western blot, se espera una banda principal a ~56 kDa; utilice inhibidores frescos de proteasas y fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar la fosforilación.
• Considere usar el anticuerpo en ELISA para cuantificar los niveles de fosforilación de AKT1 en Thr308; el emparejamiento con un anticuerpo de AKT1 total permite la normalización.
• Optimice la dilución del anticuerpo para cada aplicación y línea celular para lograr la mejor relación señal-ruido.

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