Anticuerpo Policlonal Anti-AKT1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AKT1

• AKT1 es una serina/treonina proteína quinasa, también conocida como Proteína quinasa B (PKB), perteneciente a la familia de quinasas AKT (AKT1, AKT2, AKT3). Regula diversos procesos que incluyen el metabolismo, la proliferación, la supervivencia celular, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1 media los efectos de factores de crecimiento como la insulina, IGF-1 y EGF aguas abajo de PI3K, controlando la captación de glucosa mediante la translocación de GLUT4 y la síntesis de glucógeno al inhibir GSK3. Referencias relacionadas: PMID:11994271
• Promueve la supervivencia celular fosforilando e inhibiendo factores pro-apoptóticos como BAD y MAP3K5, y activando vías de supervivencia que incluyen NF-κB y CREB1. Referencias relacionadas: PMID:11154276 PMID:9829964
• AKT1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular y el espacio intermembranal mitocondrial, reflejando su participación en múltiples compartimentos de señalización.
• AKT1 sufre modificaciones postraduccionales clave como la fosforilación y la acetilación, y se considera un protooncogén. Su expresión a menudo está regulada al alza en cánceres, y la forma fosforilada en Tyr-176 aumenta durante la progresión del cáncer de mama.
• Expresado ubicuamente en células humanas, AKT1 desempeña un papel crítico en el crecimiento y la diferenciación celular. Se observa una regulación al alza específica del tejido en malignidades de próstata y mama.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido dentro de la región C-terminal (aa 350–480) del AKT1 humano, lo que puede conferir especificidad de isoforma; sin embargo, valide con proteínas recombinantes o siRNA si la reactividad cruzada con AKT2 o AKT3 es una preocupación.
• Para la transferencia Western (Western blotting), las condiciones desnaturalizantes y reductoras típicamente revelan una banda a ~56 kDa. Use controles positivos apropiados (p. ej., lisados de HeLa, MCF-7) y considere que la movilidad observada puede reflejar el estado de fosforilación.
• Los protocolos de IF/ICC e IHC-P pueden requerir permeabilización y recuperación de antígenos respectivamente. Optimice los métodos de fijación (p. ej., PFA al 4% frente a metanol) para su tipo de muestra e incluya pasos de bloqueo para minimizar el fondo.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden configurar utilizando formatos indirectos o sándwich; el emparejamiento con un anticuerpo de captura adecuado puede mejorar la sensibilidad. Titule el anticuerpo y use un tampón de recubrimiento constante.
• Se informa reactividad cruzada con AKT1 de ratón y rata, pero verifique la homología de la secuencia específica de la especie en la región del inmunógeno si usa muestras no humanas.

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