Anticuerpo Policlonal Anti-AKT1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P31749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AKT1

• AKT1 (PKB/PKB alfa/RAC-PK-alfa) es una serina/treonina proteína cinasa y una de las tres isoformas de AKT estrechamente relacionadas (AKT1, AKT2, AKT3) que regulan procesos celulares fundamentales, incluyendo el metabolismo, la proliferación, la supervivencia, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 fosforila un amplio espectro de sustratos para controlar la señalización de la insulina, el metabolismo de la glucosa y el crecimiento celular. Fosforila TSC2, activando mTORC1 para promover la síntesis de proteínas y el crecimiento celular, y fosforila los factores de transcripción FOXO, lo que resulta en su secuestro citoplasmático y la inhibición de la expresión de genes proapoptóticos. Referencias relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:10358075, PMID:21432781
• AKT1 es crítico para la supervivencia celular: fosforila MAP3K5/ASK1 en Ser-83 para inhibir la apoptosis inducida por estrés oxidativo y fosforila BAD para bloquear su función proapoptótica. También activa CREB1, mejorando la transcripción de genes antiapoptóticos como BCL2 y MCL1. Referencias relacionadas: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 desempeña un papel clave en la captación de glucosa mediada por insulina al promover la translocación del transportador SLC2A4/GLUT4 a la membrana plasmática e inhibir GSK3, estimulando así la síntesis de glucógeno.
• AKT1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular y el espacio intermembranoso mitocondrial, lo que le permite modular la señalización en múltiples sitios subcelulares.
• Expresado de forma ubicua en tejidos humanos, los niveles de proteína AKT1 aumentan de un estado normal a uno maligno en el cáncer de próstata, y su forma fosforilada en Tyr-176 está elevada durante la progresión del cáncer de mama.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de los aminoácidos 100-200, una región central que puede ofrecer una buena accesibilidad. Considere este anticuerpo para detectar la proteína AKT1 total en varios lisados.
• Para la transferencia Western (Western blot, WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 56 kDa. Se espera una banda de este tamaño en muestras de humano, ratón y rata dada la reactividad cruzada informada. Verifique el marcador de peso molecular y use los controles de carga apropiados.
• Este anticuerpo policlonal es adecuado para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC). Optimice los métodos de recuperación de antígenos para tejidos embebidos en parafina e incluya los controles negativos adecuados para evaluar la especificidad.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección. Valide la concentración de trabajo óptima empíricamente usando el péptido inmunógeno como control positivo.
• Dado que la activación de AKT1 depende del estado de fosforilación (p. ej., Thr-308, Ser-473), considere combinarlo con anticuerpos específicos de activación para estudios de señalización.
• Debido a la similitud de secuencia entre las isoformas de AKT, verifique la especificidad de la isoforma en su sistema experimental.

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