Anti-AKT1S1/PRAS40 Rabbit pAb para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96B36

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1/PRAS40 (sustrato 1 rico en prolina de AKT1), también conocido como sustrato de AKT rico en prolina de 40 kDa (PRAS40), está codificado por el gen AKT1S1 y produce una proteína de ~27 kDa (UniProt: Q96B36); el splicing alternativo genera múltiples variantes de transcripción.
• Funciona como un regulador negativo de mTORC1, inhibiendo la actividad de la quinasa al ocupar el sitio de reclutamiento de sustratos de MTOR (PubMed:17277771, PubMed:17386266, PubMed:17510057, PubMed:29236692).
  Referencias relacionadas: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• Tras la estimulación con insulina o nutrientes, AKT1S1 se hiperfosforila y se disocia de mTORC1, aliviando así la inhibición y permitiendo que proceda la señalización de mTORC1 (PubMed:17386266, PubMed:18372248).
  Referencias relacionadas: PMID:17386266, PMID:18372248
• La función inhibidora de AKT1S1 está regulada a su vez por la fosforilación y la posterior unión a proteínas 14-3-3, lo que promueve su disociación del complejo (PubMed:16174443, PubMed:18372248).
  Referencias relacionadas: PMID:16174443, PMID:18372248
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma/citosol, lo que coincide con su función en la modulación de la actividad de mTORC1 en sitios lisosomales y citosólicos.
• AKT1S1 se expresa ampliamente en los tejidos, con los niveles más altos en hígado y corazón; su expresión a menudo está elevada en líneas celulares cancerosas (p. ej., A-549, HeLa) en comparación con las líneas normales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación en múltiples residuos de serina/treonina y la metilación; estos eventos influyen en su actividad e interacciones.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (péptido sintético, aa 150-256) se dirige a una región central de AKT1S1 humana; asegúrese de que su muestra exprese la proteína de longitud completa o isoformas que contengan este epítopo para evitar falsos negativos.
• Para la transferencia Western (Western blotting), AKT1S1 migra a aproximadamente 27 kDa; considere el uso de un control positivo como lisado de HeLa o A-549, y valide la especificidad de la banda con péptidos de bloqueo o siRNA si es necesario.
• En IHC-P e IF/ICC, tenga en cuenta la localización citoplasmática de AKT1S1; puede ser necesaria la permeabilización y la recuperación de antígenos para una detección óptima.
• Se ha informado que este anticuerpo es adecuado para ELISA; realice titulaciones en tablero de ajedrez para determinar las condiciones óptimas de recubrimiento y detección para su configuración de ensayo específica.

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