Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ALG13 para WB, ELISA - Q9NP73

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ALG13

• ALG13 es la subunidad catalítica del complejo UDP-N-acetilglucosamina transferasa, también conocida como asparagina ligada a glicosilación 13 homóloga o proteína 1 que contiene el dominio glicosiltransferasa 28. Media el segundo paso de la biosíntesis del oligosacárido ligado a dolicol en la cara citoplasmática del retículo endoplásmico.
• Junto con su socio obligado ALG14, ALG13 forma un complejo dimérico que transfiere una N-acetilglucosamina (GlcNAc) unida β1,4 desde UDP-GlcNAc a GlcNAc-pirofosfatodolicol, generando N,N′-diacetilquitobiosil difosfodolicol. Este intermedio es posteriormente alargado por ALG1 y otras glicosiltransferasas.
• El complejo ALG13/ALG14 está anclado en la membrana del retículo endoplásmico, donde se ensambla el precursor del oligosacárido ligado a dolicol antes de voltearse hacia el lumen del RE para su posterior procesamiento y eventual transferencia a polipéptidos nacientes.
• Aunque se anota como una posible enzima multifuncional basándose en motivos de secuencia (dominios de tiol proteasa, hidrolasa), no se ha detectado actividad glicosiltransferasa o desubiquitinasa para ALG13 fuera de su papel en la transferencia de GlcNAc. Sus actividades bioquímicas adicionales, si las hay, permanecen poco caracterizadas.
• Las mutaciones en el gen ALG13 se asocian con el trastorno congénito de la glicosilación tipo Is (CDG1S) y encefalopatías epilépticas infantiles tempranas (DEE36, EIEE36), lo que refleja la importancia crítica de esta enzima en el neurodesarrollo normal y la N-glicosilación global de proteínas.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de ALG13, y la proteína está sujeta a ubiquitinación (vía de conjugación Ubl), lo que puede regular su estabilidad o función.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético que abarca los residuos 100–167 de ALG13 humano (isoforma NP_001311219.1). Este epítopo se conserva en ALG13 de ratón, lo que respalda la reactividad cruzada observada con muestras de ratón.
• Para Western blot, valide la especificidad del anticuerpo incluyendo controles positivos como líneas celulares humanas o de ratón conocidas por expresar ALG13, y considere experimentos de silenciamiento con siRNA o sobreexpresión para confirmar la banda de ~126 kDa.
• Para estudiar el complejo funcional ALG13/ALG14, considere ensayos de co-inmunoprecipitación o de ligadura de proximidad combinados con la detección de ambas subunidades.
• En aplicaciones de ELISA, utilice proteína ALG13 recombinante o el péptido inmunizante como antígeno de recubrimiento para establecer curvas estándar, y valore el anticuerpo apropiadamente para una relación señal-ruido óptima.
• Dado que ALG13 es una proteína asociada a membrana, asegúrese de que los tampones de lisis contengan detergentes adecuados (por ejemplo, Tritón X-100 o NP-40 al 1%) para solubilizar eficientemente la fracción de membrana del RE.

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