Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ALIX para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8WUM4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ALIX

• ALIX (proteína de interacción con la muerte celular programada 6), también conocida como AIP1, HP95, DRIP4 y MCPH29, está codificada por el gen PDCD6IP y existe en múltiples isoformas debido al empalme alternativo.
• Es una proteína VPS de clase E esencial para la biogénesis del cuerpo multivesicular (MVB), concentrando y clasificando la carga para la formación de vesículas intralumenales a través de la vía ESCRT. Referencias relacionadas: PMID:14739459
• ALIX se une al fosfolípido ácido lisobisfosfatídico (LBPA) en las membranas internas del MVB y actúa como adaptador para un subconjunto de proteínas ESCRT-III, como CHMP4B.
• La proteína es necesaria para la citocinesis, funcionando en el paso de abscisión a través de eventos de fisión de membrana topológicamente equivalentes. Referencias relacionadas: PMID:17556548 PMID:17853893 PMID:18641129
• En conjunto con SDC1/4 y SDCBP, ALIX regula la biogénesis de exosomas, impactando en la comunicación intercelular. Referencias relacionadas: PMID:22660413
• Subcelularmente, ALIX se localiza en el citosol, melanosomas, centrosomas, uniones estrechas, anillo del cuerpo medio y es secretada en exosomas extracelulares.
• Participa en interacciones huésped-virus, facilitando la gemación del VIH-1 al interactuar con CHMP4B, y puede desempeñar funciones en la apoptosis y el mantenimiento de la barrera epitelial.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y metilación, influyendo en sus actividades multifuncionales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo es proteína recombinante; considere que el anticuerpo puede reconocer tanto ALIX nativa como desnaturalizada dependiendo de la aplicación.
• Para Western blot (WB), valide en su sistema de muestra específico y optimice la carga de proteína para detectar la banda de 96 kDa; tenga en cuenta que las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros cambios en la movilidad.
• En experimentos de IF/ICC, los métodos de fijación y permeabilización pueden afectar la tinción de diferentes grupos de ALIX (citosólico, centrosomal, cuerpo medio); considere probar múltiples protocolos.
• Para IP, confirme la compatibilidad del anticuerpo con su tampón de lisis y asegure el enriquecimiento del objetivo ejecutando controles paralelos.
• Al usar ELISA, incluya controles positivos (proteína recombinante) y negativos apropiados para evaluar la sensibilidad y especificidad.

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