Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfatasa Alcalina (ALPL) para WB, IHC-P, ELISA - P05186

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Fosfatasa Alcalina (ALPL)

• La fosfatasa alcalina, isoenzima inespecífica de tejido (ALPL), también conocida como isoenzima hígado/hueso/riñón, existe en múltiples isoformas debido al empalme alternativo y se expresa ampliamente en tejidos óseos, hepáticos y renales.
• Desempeña un papel esencial en la mineralización esquelética y dental al hidrolizar el difosfato extracelular (PPi), un potente inhibidor de la mineralización, en fosfato, promoviendo así la formación de cristales de hidroxiapatita y aumentando la concentración de fosfato inorgánico. Referencias relacionadas: PMID:23688511 PMID:25982064
• Tiene una amplia especificidad de sustrato, pero solo unos pocos sustratos son naturales, como el pirofosfato inorgánico (PPi), el piridoxal 5'-fosfato (PLP) y la N-fosfocreatina. Referencias relacionadas: PMID:12162492 PMID:2220817
• Cataliza la desfosforilación del piridoxal 5'-fosfato (PLP) a piridoxal, la forma transportable de la vitamina B6, esencial para la síntesis de neurotransmisores en el cerebro. Referencias relacionadas: PMID:20049532 PMID:2220817
• Capaz de desfosforilar productos microbianos, como lipopolisacáridos (LPS) y poli-inosina:citosina (poli I:C), potencialmente modulando las respuestas inmunitarias innatas. Referencias relacionadas: PMID:28448526
• Actúa como regulador clave de la termogénesis adaptativa como parte del ciclo fútil de creatina en las mitocondrias de las células adiposas termogénicas, hidrolizando la N-fosfocreatina para disipar energía en forma de calor sin realizar trabajo mecánico o químico.
• La proteína es una glicoproteína de membrana anclada a GPI que requiere cofactores de zinc y magnesio; se localiza en la membrana celular, la membrana de vesículas extracelulares y la membrana mitocondrial, y las mutaciones en el gen ALPL causan hipofosfatasia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 230-440 de la ALPL humana, dentro de la región central de la proteína madura. Dado que la ALPL sufre empalme alternativo, asegúrese de que el epítopo esté presente en su isoforma de interés.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 57 kDa; sin embargo, la glicosilación y otras modificaciones postraduccionales pueden hacer que la banda observada se desplace a un peso molecular aparente más alto. Utilice lisados de control positivo de tejidos óseos, hepáticos o renales, o líneas celulares que sobreexpresen ALPL.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), optimice las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, recuperación de epítopo inducida por calor) y valide la especificidad de la tinción utilizando controles de tejido deficiente o knockout para ALPL si están disponibles.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección; valore las concentraciones de anticuerpo frente a proteína ALPL recombinante o muestras naturales para determinar las diluciones de trabajo óptimas.
• Como con cualquier anticuerpo policlonal, el rendimiento puede variar entre lotes; considere validar nuevos lotes en su contexto experimental específico.

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