Anticuerpo policlonal de conejo anti-ALKBH1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13686

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ALKBH1

• ALKBH1 es una dioxigenasa de ácidos nucleicos que actúa sobre el ADN y el tRNA, y requiere oxígeno molecular, alfa-cetoglutarato y hierro como cofactores. Referencias relacionadas: PMID:18603530 PMID:27497299
• Funciona principalmente como una desmetilasa de tRNA, eliminando la N1-metiladenina de diversos tRNA, con preferencia por la posición 58 (m1A58) en el bucle T, regulando así el inicio y la elongación de la traducción. Referencias relacionadas: PMID:27745969
• En las mitocondrias, ALKBH1 oxida el mt-tRNA(Met) en la citosina(34) a 5-formilcitosina, ampliando el reconocimiento de codones para leer AUA además de AUG. Referencias relacionadas: PMID:27497299
• ALKBH1 también desmetila la N6-metiladenina del ADN, particularmente en elementos repetitivos L1 de células madre embrionarias, contribuyendo a su silenciamiento. Referencias relacionadas: PMID:30017583 PMID:30392959
• ALKBH1 presenta actividad de liasa de ADN, escindiendo sitios abásicos en el ADN, lo que genera aductos covalentes proteína-ADN; esta actividad no requiere alfa-cetoglutarato. Referencias relacionadas: PMID:19959401 PMID:23577621
• La proteína se localiza tanto en el núcleo como en las mitocondrias.
• ALKBH1 se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 110-389 de ALKBH1 humano, una región que abarca el dominio catalítico. Este diseño puede conferir una fuerte reactividad frente a la proteína de longitud completa.
• Para el Western blot, el peso molecular previsto es de 44 kDa. Pueden aparecer bandas adicionales debido al splicing alternativo, las modificaciones postraduccionales o la detección de homólogos como Alkbh1 de ratón.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, se espera tinción tanto en los compartimentos nucleares como mitocondriales, en consonancia con la localización dual de ALKBH1.
• Al realizar una inmunoprecipitación, tenga en cuenta que ALKBH1 interactúa con ácidos nucleicos; incluya un tratamiento con nucleasas si es necesario.
• El rendimiento del ELISA debe validarse utilizando el antígeno recombinante o lisados relevantes de células/tejidos; considere los efectos de matriz en muestras complejas.
• Se espera reactividad cruzada con ALKBH1 de ratón, pero confirme la identidad de la secuencia en la región del inmunógeno para otras especies si es necesario.

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