Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ALKBH5 para WB, ELISA - Q6P6C2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ALKBH5

• ALKBH5 cataliza la desmetilación oxidativa de m6A en el ARN, una reacción dependiente de oxígeno molecular, alfa-cetoglutarato y hierro, revirtiendo así la modificación de m6A en el ARNm.
  Referencias relacionadas: PMID:21264265 PMID:23177736 PMID:24489119
• A través de su actividad desmetilasa, ALKBH5 modula el procesamiento, la traducción y la exportación del ARNm, representando un regulador crítico del epitranscriptoma.
  Referencias relacionadas: PMID:23177736 PMID:34048572 PMID:36944332
• ALKBH5 también es capaz de desmetilar N(6)-metiladenosina en ADN de cadena sencilla in vitro, lo que sugiere un potencial de sustrato más amplio.
  Referencias relacionadas: PMID:24616105
• Desempeña un papel esencial en la espermatogénesis, siendo necesario para las fases meióticas tardías y haploides; la desmetilación de m6A por ALKBH5 en espermatocitos y espermátidas redondas asegura el correcto empalme y la producción de ARNm con 3'-UTR más largos en las células germinales masculinas.
• ALKBH5 participa en el ensamblaje de los paraspeckles, un orgánulo nuclear sin membrana, a través de la separación de fases líquido-líquido, siendo su actividad desmetilasa sobre el ARN no codificante NEAT1 integral para este proceso.
  Referencias relacionadas: PMID:37369679 PMID:37474102
• Como regulador negativo del desarrollo de células T, ALKBH5 inhibe la proliferación de células T gamma-delta mediante la desmetilación de los transcritos JAG1 y NOTCH2, y suprime el reclutamiento de células T reguladoras a través de la desestabilización del ARNm de CCL28.
• Subcelularmente, ALKBH5 se localiza en las motas nucleares (nuclear speckles) y en el nucleoplasma, lo que es consistente con sus funciones en el procesamiento del ARN y la dinámica de los cuerpos nucleares.
• La acetilación, fosforilación y conjugación de ubiquitina se encuentran entre las modificaciones postraduccionales anotadas para ALKBH5, las cuales pueden regular su estabilidad y actividad.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 66-394 de ALKBH5 humano) abarca una gran porción de la proteína; considere verificar la especificidad en modelos de knockout o knockdown para aplicaciones críticas.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 44 kDa; utilice lisados de tejidos con alta expresión de ALKBH5 (por ejemplo, pulmón, testículo) como controles positivos.
• En ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo para lograr una detección lineal y minimizar el fondo.
• Debido a la localización nuclear de la enzima, confirme que los protocolos de lisis y extracción sean adecuados al preparar lisados para la detección.

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