Anticuerpo monoclonal de conejo anti-alfa 1 Espectrina para WB y ELISA - P02549

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la alfa 1 Espectrina

• La proteína codificada por el gen SPTA1 es la cadena alfa de espectrina eritrocítica 1, también conocida como alfa-espectrina eritroide. Es un componente estructural clave del citoesqueleto de la membrana eritrocitaria.
• La espectrina es el componente principal de la red citoesquelética que se encuentra debajo de la membrana plasmática del eritrocito, donde se asocia con la proteína banda 4.1 y la actina para formar una superestructura que mantiene la forma y elasticidad celular.
• La cadena alfa de espectrina contiene múltiples repeticiones de espectrina, un dominio SH3 y un motivo de unión a calcio de tipo mano EF, lo que contribuye a su capacidad para unirse a la actina y organizar el citoesqueleto cortical.
• Subcelularmente, la alfa 1 espectrina se localiza en el citoplasma, el citoesqueleto y la corteza celular, lo que coincide con su función de soporte de la membrana plasmática.
• Las mutaciones en SPTA1 están asociadas con eliptocitosis hereditaria y piropoikilocitosis, lo que pone de manifiesto su función crítica en la integridad de los eritrocitos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, que puede regular las interacciones de la espectrina y la dinámica citoesquelética.
• El empalme alternativo de SPTA1 produce múltiples isoformas con patrones de expresión específicos de cada tejido.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a una región interna (aminoácidos 2300–2400), lo que indica que el anticuerpo reconoce un epítopo lineal. Para Western blot, se recomienda utilizar un sistema de gel desnaturalizante y optimizar las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular (~280 kDa).
• Dado el peso molecular previsto de 280 kDa, el uso de un gel de poliacrilamida de bajo porcentaje (por ejemplo, 6–8%) y tiempos de transferencia prolongados pueden mejorar la detección. Incluya marcadores de peso molecular adecuados para confirmar el tamaño de la banda.
• La reactividad cruzada del anticuerpo con humano, ratón y rata indica que la secuencia del epítopo está conservada. Valide el rendimiento del anticuerpo en lisados de muestras relevantes (por ejemplo, eritrocitos o líneas celulares eritroleucémicas) para confirmar su especificidad.
• Para aplicaciones de ELISA, el diseño del inmunógeno péptido admite formatos de ensayo directos o indirectos. Optimice las condiciones de recubrimiento y utilice alfa 1 espectrina recombinante o purificada como control positivo cuando esté disponible.

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