Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-AMBRA1 para WB y ELISA - Q9C0C7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AMBRA1

• AMBRA1 es el componente de reconocimiento de sustrato de un complejo ligasa de ubiquitina-proteína E3 DCX (DDB1-CUL4-X-box), que media la poliubiquitinación de proteínas diana involucradas en la progresión del ciclo celular y la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:20921139, PMID:23524951, PMID:24587252
• Actúa como un regulador maestro corriente arriba de la transición G1/S al reconocer la ciclina-D fosforilada (CCND1, CCND2, CCND3) y dirigirla para su degradación dependiente de ubiquitina, actuando así como un supresor de tumores. Referencias relacionadas: PMID:33854232, PMID:33854235, PMID:33854239
• Actúa como un regulador clave de la autofagia; tras la inducción de la autofagia, se libera del citoesqueleto para mediar la ubiquitinación ligada a 'Lys-63' de BECN1 y ULK1, mejorando la actividad de PIK3C3 y la estabilidad de ULK1 para promover la formación de autofagosomas. Referencias relacionadas: PMID:20921139, PMID:23524951
• Promueve la mitofagia al interactuar con PRKN y proteínas de la familia LC3 para dirigir las mitocondrias dañadas a los autofagosomas, y actúa como un cofactor para la ubiquitinación mediada por HUWE1 de MFN2. Referencias relacionadas: PMID:21753002, PMID:25215947, PMID:30217973
• Independientemente de su función de ligasa E3, AMBRA1 regula la estabilidad de MYC y FOXO3 a través de interacciones con la proteína fosfatasa 2A (PPP2CA), lo que conduce a la degradación de MYC y la estabilización de FOXO3, impactando así en la proliferación celular y la diferenciación de células T reguladoras. Referencias relacionadas: PMID:25438055, PMID:25803737, PMID:30513302
• La localización subcelular incluye citoplasma, citoesqueleto, retículo endoplásmico, autofagosomas, mitocondrias, núcleo y adhesiones focales, lo que refleja sus múltiples funciones en el tráfico celular y la señalización.
• Modificado postraduccionalmente por metilación y fosforilación, y contiene repeticiones WD; también está involucrado en el ensamblaje de cadenas de poliubiquitina ligadas a 'Lys-63', crítico para la transducción de señales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 961–1208 de AMBRA1 humano; por lo tanto, es probable que el anticuerpo reconozca epítopos dentro de esta región. En Western blot, espere una banda de aproximadamente 143 kDa. Considere optimizar las condiciones de bloqueo y lavado para minimizar el fondo.
• La reactividad cruzada confirmada en ratón hace que este anticuerpo sea adecuado para estudios en modelos de ratón; sin embargo, valide la detección en el tipo de tejido o célula específico de interés para garantizar especificidad y sensibilidad.
• Para aplicaciones de ELISA, las condiciones de pre-recubrimiento y los sistemas de detección deben optimizarse empíricamente; considere usar proteína AMBRA1 recombinante o lisados celulares como antígenos de recubrimiento.
• Debido al empalme alternativo, pueden existir múltiples isoformas de AMBRA1 en ciertos tipos celulares; verifique el patrón de bandas detectado contra controles conocidos en su sistema experimental.
• Este anticuerpo policlonal puede usarse para inmunoprecipitación o inmunofluorescencia con validación adicional; es poco probable que se una de forma inespecífica a otras proteínas que contengan repeticiones WD, pero esto debe descartarse mediante controles apropiados.

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