Anticuerpo Policlonal Anti-AMPKβ1 (Validado por KO) para WB, IF/ICC y ELISA - Q9Y478

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AMPKβ1

• La subunidad beta-1 de la proteína quinasa activada por 5'-AMP (AMPKβ1), codificada por el gen PRKAB1, es una subunidad reguladora no catalítica del complejo heterotrimérico de AMPK.
• AMPKβ1 actúa como un andamio, sirando de puente entre la subunidad catalítica α (PRKAA1/2) y la subunidad reguladora γ (PRKAG1/2/3) a través de su dominio C-terminal, permitiendo el ensamblaje y la actividad del complejo.
• AMPK funciona como un sensor clave de energía: bajo niveles bajos de ATP intracelular, activa vías catabólicas (generadoras de ATP) e inhibe procesos anabólicos (consumidores de ATP), manteniendo así la homeostasis energética.
• A través de la fosforilación directa de enzimas metabólicas y la regulación indirecta mediante la fosforilación de factores de transcripción, AMPK modula la biosíntesis de lípidos, la oxidación de ácidos grasos y la síntesis de proteínas.
• Más allá del metabolismo, AMPKβ1 contribuye a la regulación de la polaridad celular y la remodelación del citoesqueleto de actina, probablemente a través de la activación de miosina, influyendo en la estructura y la migración celular.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales, incluyendo la miristoilación en el extremo N‑terminal, que puede facilitar la asociación con membranas y la localización subcelular, como se refleja en palabras clave como Lipoproteína y Miristato.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1‑80) del AMPKβ1 humano; este diseño puede favorecer el reconocimiento de la proteína de longitud completa y podría evitar el enmascaramiento de epítopos en el extremo C-terminal por parte de proteínas interactuantes.
• Para el análisis de Western blot (WB) de lisados celulares humanos, de ratón o de rata, se espera una banda a aproximadamente 30 kDa; confirme la especificidad de la banda mediante el uso paralelo de agonistas o inhibidores de AMPK, o mediante knockdown mediado por siRNA/CRISPR.
• En experimentos de inmunofluorescencia (IF/ICC), la localización subcelular de AMPKβ1 es dinámica; incluya los controles apropiados y valide en el tipo celular y las condiciones de tratamiento de interés.
• Para aplicaciones de ELISA, pruebe el rendimiento del anticuerpo con la proteína recombinante AMPKβ1 o lisados celulares, y considere el uso de un par de captura/detección coincidente si desarrolla un ensayo tipo sándwich.
• Dado que se trata de un anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes; considere realizar un estudio de puente (bridging study) al adoptar un nuevo lote en flujos de trabajo validados.

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