Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-AP2S1 para WB y ELISA - P53680

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AP2S1

• AP2S1 codifica la subunidad sigma del complejo de proteínas adaptadoras 2 (AP-2), un complejo heterotetramérico esencial para la endocitosis mediada por clatrina en la membrana plasmática. También se conoce como AP17, CLAPS2, sigma2-adaptina y proteína asociada a la capa de clatrina AP17.
• Como componente central del AP-2, la subunidad sigma contribuye al reclutamiento selectivo de carga transmembranal en las vesículas recubiertas de clatrina (CCV, por sus siglas en inglés) al reconocer las señales de endocitosis Y-X-X-Φ y [ED]-X-X-X-L-[LI] dentro de las colas citosólicas de las proteínas de carga.
• El AP-2 funciona como el principal adaptador de clatrina, conectando la red de clatrina y los componentes de la membrana para impulsar la formación de vesículas y la clasificación de la carga. También participa en el reciclaje de las membranas de las vesículas sinápticas desde la superficie presináptica.
• De las cuatro subunidades (α, β2, μ2, σ2), la subunidad sigma cumple un papel en la estabilización del complejo y participa en el reconocimiento de motivos de clasificación basados en dileucina.
• A nivel subcelular, AP2S1 se localiza en la membrana celular y las fosas recubiertas, lo que coincide con su papel en los eventos endocíticos tempranos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación (según se indica en la palabra clave de UniProt), y el empalme alternativo produce diferentes isoformas.
• AP2S1 también puede contribuir a la homeostasis del calcio extracelular, aunque esta función está poco caracterizada.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo fue un péptido sintético correspondiente a la región N-terminal (aminoácidos 1-100) de AP2S1 humano. Es probable que esta región esté expuesta en la superficie de la proteína y ofrezca una buena accesibilidad al epitopo. Si es necesario, considere realizar experimentos de bloqueo con péptidos para confirmar la especificidad.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 17 kDa. Asegúrese de utilizar un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, 12-15%) y condiciones de transferencia apropiadas para proteínas de bajo peso molecular. Valide el anticuerpo en su matriz de muestra específica, ya que las modificaciones postraduccionales o las variantes de isoformas pueden influir en el patrón de bandas.
• El anticuerpo tiene reactividad cruzada con ratón, por lo que es adecuado para estudios en modelos murinos o líneas celulares de ratón. Para ELISA, considere utilizar un formato directo o indirecto con un recubrimiento de antígeno apropiado. Se recomienda realizar titulaciones y optimizaciones para cada ensayo.
• Dado el papel del AP-2 en la endocitosis, este anticuerpo puede ser útil para investigar el tráfico de carga, la internalización de receptores y la dinámica de las vesículas sinápticas. Combínelo con marcadores de organelos o ensayos funcionales para contextualizar la localización y la actividad.

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