Anticuerpo Policlonal Anti-APEX1/APE1 para WB, IF/ICC, ELISA - P27695

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de APEX1/APE1

• APEX1 es una proteína multifuncional con dos actividades principales: reparación del ADN mediante la función de endonucleasa apurínica/apirimidínica (AP) en la reparación por escisión de bases (BER), y regulación redox de factores de transcripción como FOS/JUN (complejo AP-1). Referencias relacionadas: PMID:11118054 PMID:11452037 PMID:15831793
• La actividad de endonucleasa AP cataliza la incisión hidrolítica del esqueleto de fosfodiéster en sitios AP del ADN, híbridos de ADN/ARN y ARN monocatenario, generando una rotura de cadena simple con extremos 5'-desoxirribosa fosfato y 3'-hidroxilo. Referencias relacionadas: PMID:15380100 PMID:16617147 PMID:18439621
• Posee actividad exodesoxirribonucleasa 3'-5' sobre nucleótidos desemparejados y actividad de fosfodiesterasa 3' del ADN, eliminando lesiones oxidativas como fosfoglicolato y 8-oxoguanina. Referencias relacionadas: PMID:11832948 PMID:1719477 PMID:7516064
• APEX1 participa en la recombinación de cambio de clase de inmunoglobulinas procesando sitios AP en las regiones de cambio, lo que conduce a roturas de doble cadena de ADN resueltas por unión de extremos no homólogos.
• Actúa como una endorribonucleasa involucrada en el control de calidad del ARN y el recambio de ARNm, incluida la regulación de la estabilidad del ARNm de MYC. Referencias relacionadas: PMID:19188445 PMID:19401441 PMID:21762700
• La proteína se localiza en múltiples compartimentos subcelulares: núcleo (incluyendo nucléolo y speckles), citoplasma, mitocondrias y retículo endoplásmico, lo que refleja sus diversas funciones.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación; la acetilación en Lys-6/7 estimula la actividad del promotor MDR1, contribuyendo a la resistencia a fármacos. Referencias relacionadas: PMID:18809583
• APEX1 juega un papel en la desmetilación del ADN, contribuyendo a la regulación epigenética de la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:21496894

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 1-318 de APEX1 humano (longitud completa), lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer formas tanto nativas como desnaturalizadas. Para WB, se espera una banda cerca de 36 kDa; utilice controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados de células HeLa o HEK293) y valide con silenciamiento por siRNA si es necesario.
• Para IF/ICC, anticipe tinción nuclear y posiblemente citoplasmática o mitocondrial. La co-tinción con marcadores de orgánulos (por ejemplo, laminina para núcleo, MitoTracker para mitocondrias) puede ayudar a confirmar la especificidad.
• En aplicaciones de ELISA, considere recubrir con proteína APEX1 recombinante como estándar y probar en un rango de concentraciones para optimizar la sensibilidad.
• Dado el papel de APEX1 en BER, este anticuerpo puede ser útil para detectar cambios en la expresión bajo estrés oxidativo; incluya controles relevantes (por ejemplo, células tratadas con H₂O₂) para correlacionar con las vías de respuesta al daño del ADN.
• La reactividad cruzada está validada para humano; para otras especies, verifique la homología de secuencia y realice experimentos piloto.

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