Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-APOA1 para WB, IHC-P, ELISA - P02647

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Apolipoproteína A-I

• La apolipoproteína A-I (ApoA-I) es el componente proteico principal de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) del plasma y también se encuentra en los quilomicrones, desempeñando un papel central en la homeostasis del colesterol.
• Mediante el transporte inverso de colesterol al promover la efusión de colesterol desde los tejidos periféricos y actuar como un cofactor esencial para la lecitina-colesterol aciltransferasa (LCAT), que esterifica el colesterol para su empaquetamiento en partículas HDL.
• ApoA-I es una proteína secretada sintetizada principalmente en el hígado y el intestino delgado, y luego liberada a la circulación donde se asocia con partículas lipídicas.
• El gen APOA1 pertenece al clúster de genes de apolipoproteína A1/C3/A4/A5 en el cromosoma 11 y codifica una preproproteína que sufre procesamiento proteolítico para producir la proteína madura de 243 aminoácidos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la oxidación en Met-110 y Met-136, las cuales están elevadas en individuos con factores de riesgo de enfermedad arterial coronaria como el tabaquismo y variantes del gen eNOS; la proteína también puede ser glicada, nitrada y palmitoilada.
• ApoA-I está implicada en la amiloidosis, donde ciertas variantes forman fibrillas de amiloide, y en la aterosclerosis, donde las formas oxidadas se enriquecen en las lesiones aórticas y se correlacionan con la gravedad de la enfermedad.
• Como parte del complejo SPAP, ApoA-I activa la motilidad de los espermatozoides, lo que indica una función extrahepática más allá del transporte de lípidos.
• La importancia de la proteína en el metabolismo lipídico se subraya por su asociación con los niveles de HDL y la enfermedad cardiovascular, lo que la convierte en un biomarcador clave y un objetivo terapéutico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 25–267, lo que corresponde a la forma secretada madura de ApoA-I humana; considere verificar la reactividad contra la proteína endógena en muestras biológicas relevantes (p. ej., suero, plasma o lisados hepáticos).
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~28 kDa; una banda cerca de este tamaño en muestras humanas, de ratón y rata confirma la reactividad cruzada. Optimice la preparación de la muestra para reducir la interferencia de lípidos si usa plasma o suero.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), pruebe el anticuerpo en secciones de tejido hepático o arterial aterosclerótico embebidas en parafina, utilizando una recuperación de antígeno apropiada, ya que ApoA-I es extracelular y puede requerir condiciones de recuperación suaves.
• Para ELISA, valide el par de anticuerpos en formato sándwich si se usa como reactivo de captura o detección; la naturaleza policlonal puede proporcionar amplificación de señal pero requiere una titulación cuidadosa.
• Al trabajar con formas oxidadas de ApoA-I, tenga en cuenta que la oxidación de metionina puede alterar el reconocimiento del epítopo; se recomiendan agentes reductores y muestras frescas.

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