Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-APOB para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04114

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ApoB

• La apolipoproteína B (ApoB) existe en dos isoformas principales: ApoB-48, sintetizada en el intestino e incorporada a los quilomicrones, y ApoB-100, producida en el hígado y presente en las partículas de VLDL y LDL.
• El ARNm de ApoB sufre edición de ARN específica de tejido, que introduce un codón de parada prematuro para generar la isoforma truncada ApoB-48 en el intestino.
• ApoB-100 funciona como ligando para el receptor de LDL (receptor apoB/E), mediando la unión celular y la internalización de las partículas de LDL.
• ApoB es un actor central en el metabolismo y transporte de lípidos, participa en la homeostasis del colesterol y el ensamblaje de lipoproteínas.
• Subcelularmente, ApoB se localiza en el citoplasma, se secreta al plasma y se asocia a gotas lipídicas.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, acetilación, glicosilación, formación de enlaces disulfuro y palmitoilación.
• Las mutaciones en APOB se asocian a hipercolesterolemia familiar, aterosclerosis y otros trastornos lipídicos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1890–2190 de ApoB-100 humana (NP_000375.3); esta región está ausente en la isoforma más corta ApoB-48, por lo que el anticuerpo es específico para ApoB-100 a menos que se indique lo contrario.
• Debido a su gran peso molecular (~516 kDa), utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6–8%), tiempos de transferencia prolongados y un marcador de alto peso molecular para Western blot.
• Considere validar el anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente (por ejemplo, lisados de hígado para ApoB-100, lisados de intestino para ApoB-48) para confirmar la detección de la isoforma.
• Para IHC-P e IF/ICC, optimice los protocolos de recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epitopos inducida por calor) y las condiciones de fijación para sus tipos de tejido específicos.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección; se recomienda la optimización empírica del tampón de recubrimiento, el bloqueo y las condiciones de detección.

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