Anticuerpo policlonal de conejo anti-ApoB (WB, IF/ICC, ELISA) - P04114

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la Apolipoproteína B-100

• La Apolipoproteína B (ApoB) es un componente proteico principal de los quilomicrones (apoB-48), las LDL (apoB-100) y las VLDL (apoB-100). La apoB-48 y la apoB-100 proceden del mismo gen mediante edición de ARN.
• La apoB-100 actúa como señal de reconocimiento para la unión celular y la internalización de las partículas de LDL por el receptor de apoB/E, cumpliendo un papel fundamental en la homeostasis del colesterol.
• A nivel subcelular, la ApoB-100 se localiza en el citoplasma, es secretada y se asocia a las gotas lipídicas, lo que refleja su función en el ensamblaje y la secreción de lipoproteínas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, formación de enlaces disulfuro, glicosilación, palmitoilación y fosforilación, que pueden regular su función y estabilidad.
• La ApoB-100 contiene dominios de unión a heparina y está implicada en la aterosclerosis, por lo que es un objetivo clave en la investigación de enfermedades cardiovasculares.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot (WB): Debido al gran peso molecular (~516 kDa), utilice geles de poliacrilamida de bajo porcentaje (por ejemplo, 4-6%) y tiempos de transferencia prolongados con una concentración reducida de metanol en el tampón de transferencia para garantizar una transferencia eficiente.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC): Se deben optimizar las condiciones de fijación y permeabilización, ya que la ApoB es tanto citoplasmática como secretada; una combinación de permeabilización con Triton X-100 y fijación con paraformaldehído puede ser efectiva.
• Para ELISA: El inmunógeno recombinante (aminoácidos 28-330) puede servir como control positivo útil; considere probar un rango de diluciones del anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima.
• Valide la reactividad cruzada del anticuerpo con muestras de ratón y rata utilizando lisados de tejidos o células adecuados, dada la alta homología de secuencia.

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