Anticuerpo policlonal de conejo anti-APOBEC3G para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9HC16

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de APOBEC3G

• APOBEC3G (A3G/ARCD/ARP-9/CEM15) es una citidina desaminasa que inhibe la replicación de retrovirus y la movilidad de retrotransposones a través de mecanismos dependientes e independientes de desaminación. Referencias relacionadas: PMID:12808465, PMID:16527742, PMID:17121840

• Presenta una potente actividad antiviral contra el VIH-1 deficiente en Vif, y actúa después de la penetración de la nucleocápside viral al desaminar la citosina a uracilo en el ADN viral de hebra negativa, lo que genera hipermutaciones de G a A que dañan el genoma proviral. Referencias relacionadas: PMID:12167863, PMID:12859895, PMID:14557625, PMID:12808465, PMID:12808466, PMID:12809610

• APOBEC3G se dirige selectivamente al ADN de hebra simple y no desamina el ADN de hebra doble ni el ARN. Referencias relacionadas: PMID:12808465, PMID:12809610, PMID:12970355

• Además del VIH-1, restringe una amplia gama de virus, incluidos VIS, VHB, EIAV, XMRV y SFV. Referencias relacionadas: PMID:15031497, PMID:16378963, PMID:18448976

• APOBEC3G se localiza predominantemente en el citoplasma y los cuerpos P, pero también puede encontrarse en el núcleo; su retención citoplasmática está vinculada a su función antiviral.

• Su expresión tisular se observa en bazo, testículos, ovario, leucocitos de sangre periférica y linfocitos CD4+, y está fuertemente modulada por el estado de activación/diferenciación de las células diana, lo que se correlaciona con la susceptibilidad al VIH-1.

• La proteína contiene dos dominios de desaminasa coordinadores de zinc, y sufre fosforilación, ubiquitinación y otras modificaciones postraduccionales que regulan su actividad y estabilidad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 244–257) se encuentra dentro de una región conservada de la APOBEC3G humana, lo que puede explicar la reactividad cruzada informada con los ortólogos de ratón y rata.
• Para western blotting (WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 46 kDa; sin embargo, las modificaciones postraduccionales o factores específicos de la muestra pueden generar la aparición de bandas adicionales. Valide la especificidad del anticuerpo con lisados de control positivos y negativos adecuados.
• Para IHC-P e IF/ICC, optimice los métodos de recuperación de antígeno y las diluciones del anticuerpo para el tipo de tejido o célula específico. Considere el uso de líneas celulares permisivas y no permisivas para el VIH-1 como controles para confirmar la relevancia funcional.
• En aplicaciones de ELISA, la detección emparejada con un anticuerpo de captura puede aumentar la sensibilidad del ensayo; realice una titulación del anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas.

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