Anticuerpo Monoclonal Anti-APOE para WB, IF/ICC, ELISA - P02649

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de APOE

• APOE (Apolipoproteína E) es un componente central de las lipoproteínas plasmáticas, que funciona principalmente en el transporte de lípidos mediado por lipoproteínas entre órganos a través del plasma y fluidos intersticiales, y está involucrada en la producción, conversión y eliminación de partículas de quilomicrones, VLDL, IDL y HDL (PubMed:14754908, PubMed:1911868, PubMed:6860692, PubMed:1917954). Referencias relacionadas: PMID:14754908, PMID:1911868, PMID:6860692, PMID:1917954

• APOE se une a receptores celulares como LDLR, LRP1, LRP2, LRP8 y VLDLR para mediar la captación de partículas de lipoproteínas que contienen APOE, y también tiene actividad de unión a heparina que favorece la captura en la superficie celular a través de proteoglicanos de sulfato de heparano (PubMed:12950167, PubMed:1530612, PubMed:1917954, PubMed:23676495, PubMed:7635945, PubMed:9395455). Referencias relacionadas: PMID:12950167, PMID:1530612, PMID:1917954, PMID:23676495, PMID:7635945, PMID:9395455

• Desempeña un papel crítico en el transporte inverso de colesterol al participar en la biogénesis de HDL mediada por ABCA1 y mediar la captación hepática de HDL, contribuyendo así a la homeostasis del colesterol (PubMed:14754908, PubMed:23620513, PubMed:9395455). Referencias relacionadas: PMID:14754908, PMID:23620513, PMID:9395455

• En el sistema nervioso central, APOE es importante para el transporte de lípidos, regula la supervivencia y el brote de neuronas, y puede influir en la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer a través de la regulación transcripcional dependiente de receptores de APP (PubMed:25173806, PubMed:8939961, PubMed:28111074). Referencias relacionadas: PMID:25173806, PMID:8939961, PMID:28111074

• APOE se secreta y se encuentra en el espacio extracelular, la matriz extracelular y los cuerpos multivesiculares endosomales; se produce principalmente en los hepatocitos del hígado, pero también en el cerebro (astrocitos, neuronas), glándula suprarrenal, riñón, bazo y tejido adiposo (PubMed:25173806, PubMed:10027417, PubMed:3115992). Referencias relacionadas: PMID:25173806, PMID:10027417, PMID:3115992

• APOE está involucrada en las respuestas inmunitarias innatas y adaptativas, se une al receptor de células inmunitarias LILRB4 y controla la supervivencia de las células supresoras de origen mieloide; también participa en la infección por VHC al interactuar con la glicoproteína de la envoltura viral E2 (PubMed:30333625, PubMed:25122793, PubMed:29695434). Referencias relacionadas: PMID:30333625, PMID:25122793, PMID:29695434

• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, fosforilación y oxidación; es susceptible a la glicación, y las variantes están asociadas con hiperlipidemia y la enfermedad de Alzheimer.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 19-317 de APOE humano, cubriendo la mayor parte de la proteína madura, incluida la región de unión al receptor. Este diseño puede permitir que el anticuerpo reconozca tanto las conformaciones de APOE libres de lípidos como unidas a lípidos.
• Para Western blotting, APOE se detecta a un peso molecular aparente de ~36 kDa; considere validar en muestras de hígado, cerebro o plasma donde APOE se expresa abundantemente. Utilice condiciones reductoras apropiadas, ya que APOE puede formar complejos unidos por puentes disulfuro.
• En inmunofluorescencia/ICC, tenga en cuenta que APOE se secreta principalmente; puede ser necesario optimizar la fijación y permeabilización para visualizar los depósitos intracelulares, y se recomienda la tinción conjunta con marcadores de orgánulos (por ejemplo, RE, Golgi o endosomas).
• Para ELISA, APOE se puede cuantificar en suero/plasma o sobrenadantes de cultivo celular; sin embargo, los altos niveles endógenos en suero pueden requerir optimización de la dilución y una cuidadosa generación de la curva estándar.
• Dado el papel de las isoformas de APOE en la enfermedad, los investigadores pueden considerar la validación específica de isoformas si el anticuerpo reconoce epítopos comunes; este anticuerpo se genera contra la secuencia de referencia (NP_000032.1) que corresponde a la isoforma APOE3.

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