Anticuerpo policlonal de conejo anti-ApoER2/LRP8 para WB, IF, IHC, ELISA - Q14114

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ApoER2/LRP8

• La proteína 8 relacionada con el receptor de lipoproteínas de baja densidad (LRP8), también conocida como receptor 2 de la apolipoproteína E (ApoER2), está codificada por el gen LRP8 y experimenta un corte y empalme alternativo que genera múltiples isoformas.
• LRP8 es un receptor de superficie celular para Reelin (RELN) y ligandos que contienen apolipoproteína E, y transmite señales mediante la unión a DAB1 para regular la función de los microtúbulos neuronales y la formación de capas durante el desarrollo cerebral. Referencias relacionadas: PMID:12899622, PMID:12950167, PMID:20223215
• El receptor se une a dímeros de la beta-2-glucoproteína I, lo que potencialmente suprime la agregación plaquetaria en la vasculatura. Referencias relacionadas: PMID:12807892
• LRP8 se expresa ampliamente en el segmento inicial del epidídimo, donde regula proteínas esenciales para la maduración de los espermatozoides.
• Actúa como receptor del virus del bosque de Semliki y del virus de la encefalitis transmitida por garrapatas, mediando la adhesión viral a las células y la internalización.
• A nivel subcelular, LRP8 se localiza en la membrana celular y puede secretarse; también funciona como receptor endocítico.
• Se expresa predominantemente en el cerebro y la placenta, con expresión adicional en plaquetas y células megacariocíticas, pero está ausente en el hígado.
• LRP8 contiene dominios similares al EGF, sitios de unión al calcio y enlaces disulfuro, y experimenta modificaciones postraduccionales que incluyen glucosilación, fosforilación y conjugación con ubiquitina.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido C-terminal (desde el aminoácido 900 hasta el extremo C-terminal); por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer isoformas de longitud completa y C-terminales, pero debe considerarse la posible ocultación del epítopo en ensayos basados en células.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular previsto es de aproximadamente 106 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, 8 % de acrilamida) y valide el anticuerpo utilizando lisados de tejidos humanos o de rata que expresen LRP8, como cerebro o placenta.
• En la inmunofluorescencia de cortes incluidos en parafina (IF-P) y la inmunohistoquímica de cortes incluidos en parafina (IHC-P), deben optimizarse las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, tampón de citrato a pH 6,0 o tampón de EDTA a pH 9,0) para los tipos de tejido que expresen LRP8.
• Para ELISA, evalúe la compatibilidad de pares de anticuerpos si se utilizan en ensayos tipo sándwich, ya que la naturaleza policlonal puede proporcionar una alta avidez, pero también podría producir reactividad cruzada con receptores relacionados como VLDLR.
• Dado que LRP8 se expresa en el cerebro y los tejidos reproductivos, incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de cerebro de ratón o rata) y controles negativos (por ejemplo, tejido hepático, que carece de expresión) para confirmar la especificidad.
• Debido a su función en la entrada viral, el anticuerpo puede estudiarse en investigaciones de infección, pero debe confirmarse la reactividad cruzada con proteínas virales o líneas celulares infectadas.

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