Anticuerpo monoclonal de conejo anti-APP (proteína precursora de beta amiloide) [validado por KO] para WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P05067

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de APP

• APP es un receptor de superficie celular que promueve el crecimiento de neuritas, la adhesión neuronal y la sinaptogénesis a través de interacciones homofílicas (PubMed:25122912). Referencias relacionadas: PMID:25122912
• Funciona como receptor de membrana de la quinesina I, mediando el transporte anterógrado axonal de beta-secretasa y presenilina 1 hacia las sinapsis (PubMed:17062754, PubMed:23011729). Referencias relacionadas: PMID:17062754 | PMID:23011729
• APP participa en la homeostasis del cobre y el estrés oxidativo; la APP metalada con cobre puede inducir la muerte neuronal o potenciar la oxidación de lipoproteínas de baja densidad mediada por Cu2+.
• Los péptidos beta amiloide derivados de APP son quelantes lipofílicos de metales que se unen a cobre, zinc y hierro, promueven la agregación de tau y contribuyen al estrés oxidativo y la neuroinflamación.
• El empalme alternativo genera isoformas como APP695 (predominante en tejido neuronal), APP751 y APP770 (no neuronal); la isoforma APP751 es abundante en linfocitos T, y la appican se expresa en astrocitos.
• La localización subcelular incluye membrana celular, fosas cubiertas de clatrina, endosomas tempranos, aparato de Golgi, retículo endoplásmico, núcleo y proyecciones celulares como los conos de crecimiento; también se detectan formas secretadas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación, formación de enlaces disulfuro y ubiquitinación; algunas isoformas poseen un dominio BPTI con actividad de inhibidor de serina proteasa.
• Palabras clave de UniProt incluyen enfermedad de Alzheimer, amiloidosis, apoptosis, adhesión celular, cobre, hierro, unión a zinc, neurodegeneración, vía de señalización Notch, inhibidor de serina proteasa y conjugación de Ubl.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido entre los aminoácidos 671-770 de la APP humana, que incluye la secuencia de beta amiloide; el anticuerpo puede detectar APP de longitud completa y fragmentos C-terminales que contienen esta región.
• Para WB, se recomienda validar el anticuerpo usando lisados de cerebro humano, de ratón o de rata o líneas celulares que expresen APP; se espera una banda de ~87 kDa para la APP de longitud completa.
• El anticuerpo está validado por KO, por lo que es adecuado para confirmar la eliminación de APP en líneas celulares mediante WB.
• Para IHC-P, optimice la recuperación de antígeno e incluya controles adecuados; la señal puede variar según la fijación y el procesamiento del tejido.
• En IF/ICC, se espera tinción punteada en membrana y compartimentos intracelulares; utilice pasos adecuados de permeabilización y bloqueo.
• La reactividad reportada del anticuerpo en ELISA sugiere un potencial para la detección cuantitativa de APP en suero, LCR o ensayos de proteínas recombinantes; se recomienda realizar pruebas piloto con su formato de antígeno específico.

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