Anticuerpo monoclonal de conejo anti-APRT (Validado por KD) para WB, IF/ICC, ELISA - P07741

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de APRT

• La adenina fosforibosiltransferasa (APRT) cataliza la síntesis de recuperación de AMP a partir de adenina y 5-fosforribosil 1-pirofosfato (PRPP), una reacción que tiene un costo energético menor que la biosíntesis de novo de purinas.
• Esta enzima proporciona una vía alternativa para mantener los pools de nucleótidos adenilados, especialmente importante en tejidos con altas demandas energéticas o capacidad limitada de síntesis de novo.
• APRT pertenece a la familia de las purina/pirimidina fosforibosiltransferasas y se encuentra evolutivamente conservada entre las especies.
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma, lo que coincide con su papel en el metabolismo citoplasmático de nucleótidos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular la actividad o estabilidad de la enzima; el empalme alternativo genera múltiples variantes de transcripción.
• Las mutaciones en el gen APRT se asocian con la deficiencia de adenina fosforibosiltransferasa, un trastorno que conduce a urolitiasis por 2,8-dihidroxiadenina y enfermedad renal crónica (palabra clave de variante de enfermedad).
• El peso molecular de la isoforma canónica es de aproximadamente 19,6 kDa, lo que coincide con la banda observada de 20 kDa en Western blotting.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la APRT humana de longitud completa (residuos 1–180), lo que sugiere el reconocimiento de formas nativas y desnaturalizadas; valide en los sistemas de muestra correspondientes.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 20 kDa; utilice marcadores de peso molecular apropiados y considere controles de carga para el análisis cuantitativo.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, se debe observar tinción citoplasmática; controles como líneas celulares knockout para APRT pueden ayudar a confirmar la especificidad.
• El rendimiento en ELISA puede depender de las condiciones de recubrimiento y la dilución del anticuerpo; se recomienda la optimización.
• Se ha confirmado la reactividad cruzada con la APRT de ratón y rata, pero la homología de secuencia sugiere un posible reconocimiento de otras especies de mamíferos; verifíquelo si se usa fuera de humana, ratón o rata.

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