Anticuerpo policlonal de conejo anti-APTX para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q7Z2E3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de APTX

• La aprataxina (APTX), también conocida como proteína similar a la tríada de histidina del dominio asociado a forkhead (FHA-HIT), es una proteína de unión al ADN implicada en la reparación de roturas de cadena sencilla, reparación de roturas de doble cadena y reparación por escisión de bases (PubMed:15044383, PubMed:15380105, PubMed:16964241). Resuelve los intermedios de ligación de ADN abortivos catalizando la liberación de grupos adenilato de los terminales 5'-fosfato, generando terminales 5'-fosfato que pueden ser unidos eficientemente (PubMed:16964241, PubMed:17276982, PubMed:24362567). Referencias relacionadas: PMID:15044383, PMID:15380105, PMID:16964241, PMID:17276982, PMID:24362567

• APTX también hidroliza el adenosín 5'-monofosforamidato (AMP-NH(2)) y el diadenosín tetrafosfato (AppppA), aunque con menor actividad catalítica (PubMed:16547001). Muestra una mayor actividad específica con adenosina unida en 5' (AppDNA) en comparación con los aductos de ADN de guanosina o inosina unidos en 3' (por similitud). Referencias relacionadas: PMID:16547001

• La proteína se localiza predominantemente en el núcleo, incluyendo el nucleoplasma y el nucléolo, pero también se detecta en el citoplasma.

• APTX contiene un dedo de zinc y un dominio FHA, requiriendo la unión de iones metálicos para su actividad. Está sujeta a fosforilación (palabra clave fosfoproteína).

• La isoforma 1 se expresa altamente en la corteza cerebral y el cerebelo en relación con la isoforma 2. APTX se expresa ampliamente en tejidos como hígado, riñón, ganglios linfáticos, músculo esquelético, fibroblastos, linfocitos y páncreas (PubMed:14755728, PubMed:11586299, PubMed:11586300, PubMed:15276230). Referencias relacionadas: PMID:14755728, PMID:11586299, PMID:11586300, PMID:15276230

• Las mutaciones en APTX causan ataxia con apraxia oculomotora tipo 1 (AOA1), un trastorno neurodegenerativo, lo que destaca su papel esencial en la reparación del ADN neuronal.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (proteína recombinante que abarca los aminoácidos 93-342 de la APTX humana) cubre el dominio catalítico HIT; por lo tanto, el anticuerpo policlonal resultante puede reconocer ambas isoformas. Verifique la detección de isoformas en su sistema de muestra.
• Para Western blot (WB), el peso molecular previsto es de 41 kDa, pero las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros cambios. Utilice controles positivos apropiados (p. ej., lisados de HeLa, HEK293) y valide con silenciamiento por siRNA si es posible.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), se espera tinción nuclear con posible enriquecimiento nucleolar. Realice una tinción conjunta con un marcador nucleolar (p. ej., fibrilarina) para confirmar la localización.
• Para inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede capturar APTX y sus proteínas interactoras involucradas en la reparación del ADN. Optimice las condiciones del tampón de lisis (p. ej., concentración de sal, detergente) para preservar los complejos proteicos.
• Las aplicaciones de ELISA pueden desarrollarse utilizando proteína APTX recombinante o péptido como estándar. Titule el anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima.
• Este anticuerpo está validado para reactividad humana; la reactividad cruzada con otras especies no ha sido determinada. Si utiliza muestras no humanas, se recomienda la alineación de secuencias de la región del inmunógeno.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

CamelBio proporciona a los fabricantes de diagnósticos y laboratorios de investigación una solución de abastecimiento integral para materias primas de IVD, incluyendo pares de anticuerpos validados, anticuerpos policlonales y monoclonales optimizados, y reactivos auxiliares a granel. Centrándose en la investigación de la reparación del ADN y enfermedades neurodegenerativas, este anticuerpo anti-APTX ejemplifica nuestro compromiso de suministrar materias primas de alta calidad para objetivos poco comunes, acelerando el desarrollo de sus ensayos desde el concepto hasta la clínica. Asóciese con CamelBio para obtener un abastecimiento fiable y escalable, además de soporte técnico experto adaptado a sus necesidades diagnósticas y de investigación.