Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ARF5 para WB, ELISA - P84085

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ARF5

• ARF5 es un miembro de la familia de pequeñas GTPasas del factor de ADP-ribosilación (ARF), que desempeñan funciones esenciales en el tráfico vesicular intracelular y la estructura de los orgánulos.
• Funciona como una proteína de unión a GTP que contribuye a la gemación y desencapsulado de vesículas en el aparato de Golgi, mediando el transporte de proteínas entre el retículo endoplásmico y el Golgi.
• ARF5 regula la actividad de mTORC1 promoviendo el reclutamiento de mTORC1 a las protuberancias de la membrana plasmática, facilitando así su activación a través de la vía de señalización PI3K/Akt. Referencias relacionadas: PMID:36735494
• Actúa como un respondedor temprano al daño lisosomal y participa en las vías de control de calidad lisosomal, destacando su papel en el mantenimiento de la homeostasis celular. Referencias relacionadas: PMID:41293316
• Durante la infección microbiana, ARF5 sirve como activador alostérico de la subunidad catalítica de la toxina del cólera, una ADP-ribosiltransferasa, lo que indica su participación en las interacciones huésped-patógeno.
• La proteína se localiza en múltiples compartimentos celulares, incluidos la membrana celular, el aparato de Golgi, la membrana de la red trans-Golgi, el citoplasma (región perinuclear) y la membrana lisosomal.
• ARF5 se caracteriza por modificaciones postraduccionales como la N-miristoilación, que la ancla a las membranas, y contiene dominios conservados de unión a GTP esenciales para sus funciones reguladoras.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1-180) de ARF5 humano. Esta región incluye el dominio conservado de unión a GTP y es probable que detecte ARF5 de longitud completa. Considere usar un lisado de control positivo de HeLa, HEK293 u otras líneas celulares humanas que expresen ARF5 para la validación por Western blot.
• Para Western blot, el peso molecular predicho de ARF5 es de aproximadamente 21 kDa. Utilice condiciones de SDS-PAGE reductoras y un tampón de bloqueo estándar. Optimice la dilución del anticuerpo primario empíricamente entre 1:500 y 1:2000, e incluya un anticuerpo secundario apropiado para la especie.
• El anticuerpo es adecuado para aplicaciones de ELISA. Para ELISA directo o sándwich, valore el anticuerpo contra la proteína recombinante utilizada como inmunógeno o contra lisados celulares para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y detección.
• Se reporta reactividad cruzada con ARF5 humano, de ratón y de rata. Cuando trabaje con muestras de ratón o rata, valide el anticuerpo en su sistema modelo específico, ya que las modificaciones postraduccionales o los niveles de expresión de proteínas pueden variar.

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