Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ARMET/ARP/MANF para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P55145

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MANF (ARMET/ARP)

• El factor neurotrófico derivado de astrocitos mesencefálicos (MANF), también conocido como proteína rica en arginina (ARMET/ARP), es un factor neurotrófico secretado que promueve la supervivencia de las neuronas dopaminérgicas y modula la transmisión GABAérgica en la sustancia negra. Referencias relacionadas: PMID:12794311
• MANF inhibe la proliferación celular y la muerte celular inducida por estrés del retículo endoplásmico (RE). Se retiene en el RE/retículo sarcoplásmico mediante su asociación con el chaperón HSPA5/BiP en condiciones normales y se secreta ante el estrés del RE. Referencias relacionadas: PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• El MANF secretado se une al 3-O-sulfogalactosilceramida (sulfátido) en las membranas de las células diana, promoviendo la captación celular por endocitosis, lo cual es necesario para su función en la mitigación del estrés del RE y la toxicidad celular en condiciones hipóxicas. Referencias relacionadas: PMID:29497057
• MANF es esencial para el desarrollo pulmonar embrionario, la arquitectura de la pulpa blanca esplénica posnatal, la osificación endocondral y la reparación del músculo esquelético, donde regula las transiciones fenotípicas de los macrófagos para limitar la inflamación.
• A nivel subcelular, MANF se localiza en la luz del retículo endoplásmico y en la luz del retículo sarcoplásmico en condiciones normales, y se secreta en respuesta al estrés.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de puentes disulfuro, fosforilación y adición de ácido siálico. MANF funciona en la respuesta a proteínas desplegadas (UPR) y en las vías de respuesta al estrés.
• Las mutaciones en MANF se asocian con sordera, diabetes mellitus y enanismo, lo que subraya sus diversos roles fisiológicos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 25-182 de MANF humano, cubriendo el polipéptido maduro. Esta región está bien conservada entre humano, ratón y rata, lo que respalda la reactividad cruzada.
• Western blot (WB): El peso molecular predicho es de 21 kDa; sin embargo, considere que las modificaciones postraduccionales (p. ej., glicosilación) pueden causar ligeros desplazamientos en las bandas. Valide con controles positivos apropiados y considere modelos de inducción de estrés del RE para evaluar la secreción regulada.
• Inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunocitoquímica (IF/ICC): Debido a la secreción y localización en el RE de MANF, asegure una permeabilización adecuada e incluya marcadores del RE para estudios de colocalización. Optimice la recuperación de antígenos para secciones incluidas en parafina.
• Inmunoprecipitación (IP) y ELISA: La naturaleza policlonal proporciona una capacidad robusta de captura y detección. Para ELISA sándwich, considere emparejarlo con un anticuerpo monoclonal que reconozca un epítopo distinto.
• Nota general: Al ser un anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes en su sistema de ensayo específico. Incluya siempre los controles de isotipo y negativos apropiados.

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