Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ASAH1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13510

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ASAH1 (Ceramidasa Ácida)

• ASAH1 codifica una enzima lisosomal que hidroliza las ceramidas en esfingosina y ácidos grasos libres a pH ácido, con mayor eficiencia catalítica hacia las ceramidas C12 (PubMed:10610716, PubMed:15655246, PubMed:7744740). Referencias relacionadas: PMID:10610716 PMID:15655246 PMID:7744740
• La enzima también cataliza la reacción inversa, sintetizando ceramidas a partir de esfingosina y ácidos grasos, con preferencia por la D-eritro esfingosina y los ácidos grasos C12 o C14 (PubMed:12764132, PubMed:12815059). Referencias relacionadas: PMID:12764132 PMID:12815059
• ASAH1 también exhibe actividad hidrolasa de N-aciletanolamina, contribuyendo a la regulación de moléculas de señalización de lípidos bioactivos (PubMed:15655246). Referencias relacionadas: PMID:15655246
• Al regular los niveles de ceramida, esfingosina y esfingosina-1-fosfato en la epidermis, ASAH1 media la diferenciación inducida por calcio de los queratinocitos epidérmicos (PubMed:17713573). Referencias relacionadas: PMID:17713573
• ASAH1 regula indirectamente la apoptosis inducida por el factor de necrosis tumoral (TNF) a través del equilibrio de ceramida y esfingosina (Por similitud).
• En las células de la corteza suprarrenal, ASAH1 puede regular directamente la esteroidogénesis uniéndose al receptor nuclear NR5A1 y regulando negativamente su actividad transcripcional (PubMed:22261821). Referencias relacionadas: PMID:22261821
• La localización subcelular incluye el lisosoma, pero ASAH1 también se puede encontrar en el núcleo, el citoplasma y secretarse.
• ASAH1 se expresa ampliamente con una mayor expresión en el corazón.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 140–389) cubre una gran parte de la secuencia de la ceramidasa ácida madura; este diseño puede producir anticuerpos que reconozcan tanto el precursor de longitud completa como las formas procesadas. Considere validar la detección de isoformas en su sistema de muestra.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 45 kDa, pero el procesamiento puede generar fragmentos más pequeños. Use condiciones reductoras y verifique los patrones de bandas con los controles apropiados, especialmente en lisados de humano, ratón o rata.
• En experimentos de IF/ICC, se deben determinar las condiciones óptimas de fijación y permeabilización para preservar la localización lisosomal. La tinción simultánea con marcadores de orgánulos puede ayudar a confirmar la especificidad.
• Al usar este anticuerpo en ELISA, considere su naturaleza policlonal para el reactivo de captura o detección; el emparejamiento con un anticuerpo monoclonal puede mejorar la relación señal-ruido. Optimice las condiciones de recubrimiento y bloqueo para su formato de ensayo específico.

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